贵州省黔东南州规模猪场猪伪狂犬病gE抗体检测

汪一江 田 珂 刘荣枝 张人俊 毛以智 吴通奎 王 彬 汪忠荣*

(1 东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨 150006；2 贵州农业职业学院，贵州贵阳 551400；3 贵州省黔东南州动物疫病预防控制中心，贵州凯里 556000；4 贵州省动物疫病预防控制中心，贵州贵阳 550008；5 贵州大学动物科学院，贵州贵阳 550025）

猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）是一种可引起多种动物共患的烈性传染病病毒，患病猪是该病毒的主要储存宿主[1]，农业农村部最新发布的动物疫病病种名录中明确将其列为二类动物疫病，并被列为规模种猪场必须净化的病种之一。据有关研究资料报道，从2011年起，全国猪场PRV-gE 抗体阳性率在增加[2]。在贵州省也有对部分地区猪伪狂犬病野毒感染情况的研究[3]，但针对黔东南州规模猪场比较全面的猪伪狂犬病gE抗体阳性率调查方面的研究报道还未见到，因此，本研究在2022年对黔东南州辖区内规模猪场（含合作社）的猪群进行伪狂犬病gE抗体监测，分析不同季节、不同生长阶段和不同饲养条件下猪伪狂犬病gE抗体阳性率，为黔东南州猪伪狂犬病的净化、有效预防与控制提供科学的数据支撑，为生猪健康发展提供一定参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验样品

采集贵州省黔东南州16 个县市不同规模猪场临床健康猪群的血液，分离血清，弃去溶血样品，-86℃保存。共收集血清样品1 388 份。

1.1.2 试剂来源

猪伪狂犬病病毒gE 蛋白ELISA 抗体检测试剂盒（批号：20220906，武汉科前生物股份有限公司）由贵州省动物疫病预防控制中心赠送。

1.1.3 主要仪器

生物安全柜（BSC-1100ⅡA-2）生产厂家为济南鑫贝西生物技术有限公司，酶标仪生产厂家为赛默飞世尔仪器有限公司，台式离心机生产厂家为江苏金坛双捷实验仪器厂，-86℃超低温冰箱（TH-86-500-LA）生产厂家为北京天地精仪科技有限公司，生化培养箱购于上海双捷实验设备有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 检测

试剂室温平衡，稀释血清，加入包被板、温育、洗板、加入酶标记物、洗板、加入底物液、避光显色后加入终止液，记录酶标仪上630 nm 波长的读数。

1.2.2 结果判定

将读取的OD630nm值根据公式计算，若试验成立，根据读数判定样品的阴阳性。用Excel 软件对数据进行统计汇总。

2 结果与分析

2.1 不同季度猪伪狂犬病gE抗体

从表1 可见，2022年第一季度检测生猪243 头，猪伪狂犬病gE抗体阳性头数为51 头，阳性率为20.99%，4 个季度中阳性率最低；第二季度的阳性率为29.34%（93/317）；第三季度的阳性率为35.29%（144/408），在4 个季度的检测中阳性率最高；第四季度的阳性率为23.33%（98/420）。全年猪伪狂犬病gE抗体阳性率为27.81%。按照季度排序为第三季度＞第二季度＞第四季度＞第一季度的猪伪狂犬病gE抗体阳性率。

表1 不同季度猪伪狂犬病gE抗体阳性率

2.2 不同生长阶段猪群伪狂犬病gE抗体

从表2 可看出，生产母猪的猪伪狂犬病gE抗体阳性率为31.99%（167/522），种公猪抗体阳性率为7.34%（8/109），哺乳仔猪抗体阳性率为46.10%（71/154），保育仔猪抗体阳性率为28.40%（69/243），育肥猪抗体阳性率为20.28%（73/360）。由此可知，猪群中猪伪狂犬病gE抗体阳性率由高到低依次为：哺乳仔猪＞生产母猪＞保育仔猪＞育肥猪＞种公猪。

表2 不同生长猪阶段猪群猪伪狂犬病gE抗体阳性率

2.3 不同饲养条件猪群伪狂犬病gE抗体

从表3 可知，小型猪场（合作社）猪伪狂犬病gE抗体阳性率为45.41%（198/436），高于中型猪场的阳性率（27.08%），远高于大型猪场的抗体阳性率（10.61%）。

表3 不同饲养条件猪群猪伪狂犬病gE抗体阳性率

3 讨论

gE 基因是PRV 的主要毒力基因[4]，该基因编码产生的蛋白抗体可以应用ELISA 法区分与gE 基因缺失疫苗免疫产生的抗体。据有关研究显示，近年来，我国多地相继发生了猪伪狂犬病，猪伪狂犬病gE抗体阳性率呈上升趋势，本次调查结果黔东南州规模猪场PRV-gE 抗体平均阳性率为27.81%，高于2018年汪忠荣等[5]对黔东南州部分规模化猪场的调查结果，这与全国猪伪狂犬病野毒感染调查相关研究变化趋势一致[6-8]。在研究调查中还发现，小型猪场或合作社猪伪狂犬病gE抗体阳性率相对较高，黔东南州小型合作社大多是几户或十几户村民自发组织成立的，部分小型猪场由原有养殖大户发展而成，饲养管理粗放，奉行原生态饲养模式，对动物疫病防控的意识较低。同时，国家将猪伪狂犬病免疫列入常规强制免疫病种，费用需养殖场自行负担，基于成本考虑，养殖场主更不愿意接种猪伪狂犬病疫苗。此外，黔东南州民族节日较多，村民走亲访友较频繁，一旦有猪伪狂犬病疫情发生，更易造成病毒的传播和扩散，在一定层面推动了该地区猪伪狂犬病的流行和传播。因此，政府应加强猪伪狂犬病防控知识的宣传和指导，同时，加强指导大型规模场对猪伪狂犬病的净化，提升生物安全管理水平和意识。

黔东南州夏秋多雨，易引发山洪，蚊虫较多，鼠类活动也较多，增加了疫病防控难度。本次调查结果显示，第二季度和第三季度猪伪狂犬病gE抗体阳性率均较高，第三季度最高。猪伪狂犬病的主要传染源来自发病猪、隐性带毒猪和鼠类，但犬猫食用含有病毒的老鼠或病死猪废弃物，也会将病毒传播和扩散。小型养殖场（或合作社）对场内防鼠防鸟设施设备和管理措施不是很重视，到夏秋季鼠类活动频繁，饲料等常有被鼠类偷食现象。此外，很多小型养殖场主喜欢在场内饲养几只猎犬，且几乎采取放养方式，猎犬食物来源复杂[9]。因此，第二、三季度猪伪狂犬病gE抗体阳性率上升可能与鼠类和犬类活动频繁有关。有研究发现，猪在潮湿、气温多变的夏季、秋季更容易感染猪伪狂犬病，提示在夏季，更要注重该病的防控，本次调查与相关研究资料报道基本一致[10]。

在隐性带毒猪场，随着生产母猪胎次的增加，猪伪狂犬病gE抗体阳性率也会增加，哺乳仔猪猪伪狂犬病gE抗体水平高低与母猪乳汁带毒相关，在本次调查中，生产母猪和哺乳仔猪的伪狂犬病gE抗体阳性率都相对较高，结果与他人研究结果一致[11,12]。因此，应加强猪场猪伪狂犬病的监测，推行种猪净化，应及时进行淘汰猪伪狂犬gE 抗体阳性个体或生产性能不佳的母猪。对曾为伪狂犬病gE抗体阳性猪场，建议采用伪狂犬病基因缺失疫苗实施免疫接种，并定期采样检测免疫效果，根据检测情况，建立完善适合本场的免疫程序，以防止病毒对未感染猪群及仔猪的早期感染。育肥猪群检测到猪伪狂犬病毒gE 抗体阳性，提示生猪在育肥猪阶段也存在感染猪伪狂犬病病毒的风险，有研究表明，生猪在120日龄后感染猪伪狂犬病野毒的概率会逐渐增加，建议对育肥猪在100日龄加强1 次猪伪狂犬病疫苗免疫，防止野毒感染[13-15]。同时，育肥场也应关注猪群的免疫程序是否科学合理，加强采样监测等，定期开展风险评估，降低因感染病毒而对猪群造成的危害，减少经济损失。

4 结论

贵州省黔东南州规模猪场存在猪伪狂犬病gE抗体阳性，且有上升趋势，2022年的第二季度和第三季度相对较高，使其感染呈现一定的季节性，比较检测结果还发现，小型养猪场（合作社）猪伪狂犬病毒gE 抗体阳性率最高，说明在今后伪狂犬病的防控中，小型养猪场（合作社）应作为重点监测对象，并加以关注。