超高效液相色谱-串联质谱法检测汤料食品中的罂粟壳成分

◎ 高友汉

（扎鲁特旗市场检验检测中心，内蒙古 通辽 029100）

有学者通过研究发现，罂粟壳中的生物碱类物质会对人的睡眠质量、性格、思维逻辑以及记忆等造成影响，如果食用量过多，会出现嗜睡、思维逻辑能力显著降低以及记忆力下降等问题，甚至出现精神失常，严重时会出现死亡等[1]。目前，虽然我国在这一方面出台了一些政策，加大了对各种食品的监督力度，依法查处不符合规定食品的违法行为，但仍然存在违规违法添加现象[2]。本研究使用超高效液相色谱-串联质谱法，检测了汤料食品中罂粟壳成分的罂粟碱、那可丁、蒂巴因、可待因及吗啡，旨在为相关检测实验提供参考。

1 材料与方法

1.1 一般材料

1.1.1 试剂与材料

盐酸罂粟碱（黑龙江金九药业有限责任公司）、盐酸那可丁（东北制药集团公司沈阳第一制药厂）、蒂巴因（上海哈灵生物科技有限公司）、磷酸可待因（宜昌人福药业有限责任公司）、吗啡（青海制药厂有限公司）、乙腈（德国merck公司）、甲酸、甲酸铵（Themo Fisher 公司）、超纯水（屈臣氏集团）、正己烷（天津市康科德科技有限公司）、盐酸（北京化工厂）。汤料购买于街市店面。

1.1.2 仪器与设备

超高压液相色谱串联四极杆质谱仪（美国赛默飞世尔公司）、三重四极杆气相色谱质谱联用仪（美国安捷伦科技有限公司）、XS105DU 电子天平[梅特勒-托利多国际贸易（上海）有限公司]、KQ5200B 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、TG16MW 型台式高速离心机（湖南赫西仪器装备有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 实验样品前处理

通过电子天平，称取1 g 样品溶于50 mL 离心管中，再加入100 μL 同位素内标工作液，加入5 mL的0.1 mol·L-1浓度的盐酸溶液，通过超声波清洗器超声10 min，通过4 000 r·min-1高速离心机离心10 min，结束去除下层清液。然后再加入5 mL的0.1 mol·L-1浓度的盐酸溶液重复上述操作，将2 次获得的液体放入5 mL 离心管中，并加入5 mL正己烷匀速摇匀，通过4 000 r·min-1高速离心机离心5 min，除去正己烷层，最后过MCX 固相萃取柱，等氮气吹干后使用乙腈定容到1 mL，通过0.22 μm滤膜上机分析[3-4]。

1.2.2 实验测定条件

色谱柱，XBridge BEH HILIC/BEH Amide（1.7、2.5、3.5、5 μm），流动相A 相0.1%甲酸乙腈溶液、B 相0.1% 甲酸的10 mmol·L-1乙酸铵溶液，进样量1.0 μL，梯度洗脱程序详见表1。

表1 梯度洗脱程序表

质谱条件，正离子源喷雾、多反应监测扫描方式、3.2 kV 毛细管电压、离子源温度150 ℃、脱溶剂气温度400 ℃、脱溶剂气流量900 L·Hr-1、锥气孔流量50 L·Hr-1、碰撞气（N2）流速0.15 mL·min-1。质谱条件数据详见表2。

表2 质谱条件数据表

2 结果与分析

2.1 提取液的选择

本次实验对0.1 mol·L-1浓度的盐酸溶液、0.1%甲酸乙腈溶液，以及1%三氯乙酸溶液的提取液进行对比分析，证明了0.1%甲酸乙腈溶液能够直接提取，特别是在蛋白质较多的汤料食品样品中，提取沉淀的效果更加明显，提取效率比其他2个溶液提取液高一些。因此，本次实验选择0.1%甲酸乙腈溶液作为提取液[5]。

2.2 流动相洗脱梯度优化

当选择有机浓度高的等度洗脱时，极性强的化合物先出峰，分离度也较好；当选择有机浓度低的等度洗脱时，极性强的化合物出峰时间会出现重叠现象，分离度不理想，因此选择梯度洗脱。如图1 所示，那可丁1、罂粟碱2、蒂巴因3、可待因4 以及吗啡5 出峰时间分别为1.87、2.32、4.06、6.19、6.48 min，分离效果好，对目标化合物干扰小。

图1 罂粟碱、那可丁、蒂巴因、可待因以及吗啡色谱图

2.3 质谱条件的优化

本次实验选取汤料食品样品中的罂粟壳物质标准品，并采用多反应检查扫描方式进行离子优化，找到最佳毛细管电压3.2 kV、锥气电压、碰撞能量。通过对5 种罂粟壳成分进行逐一优化，找到了最佳定性离子对、锥气电压以及碰撞能量，具体数据见表2，以响应信号最高的为定量离子，其次为定性离子。

2.4 线性范围和检出限

对配置好的标准溶液上机检测，吗啡与可待因在添加浓度范围0.6～22 μg·L-1范围内的线性关系良好，罂粟碱、那可丁以及蒂巴因在添加浓度范围0.2～6.0 μg·L-1范围内的线性关系良好。数值均大于0.995，具体数据见表3。

表3 罂粟壳成分的线性实验结果表

2.5 回收率与精密度

通过超高效液相色谱-串联质谱法检测方法，检测汤料食品中罂粟壳成分，对汤料食品中的罂粟碱、那可丁、蒂巴因、可待因以及吗啡进行检测。其中，在进行加标实验时，罂粟碱、那可丁以及蒂巴因分别为0.25、2.5、25.0 μg·kg-1，可待因与吗啡分别为0.5、5.0、50.0 μg·kg-1，对每个水平进行测定。结果显示，可待因与吗啡回收率为77.45%～94.47%，罂粟碱、那可丁以及蒂巴因回收率为79.13%～95.38%，该种方法精密度与准确度较高，具体数据见表4。

表4 罂粟壳成分加标回收率表

3 结语

综上所述，本文建立了检测汤料食品中罂粟壳成分的超高效液相色谱-串联质谱法检测方法，采用多反应监测扫描方式得出检测结果。吗啡与可待因的添加浓度范围是0.6～22 μg·L-1，回收率为77.45%～94.47%；罂粟碱、那可丁以及蒂巴因的添加浓度范围是0.2～6.0 μg·L-1，回收率为79.13%～95.38%。该检测方法简单易操作，检测准确，且精密度高，既可为汤料食品中的罂粟壳成分检测提供技术保障，也可为相关检测实验提供参考。