miRNA-223、miRNA-21 及miRNA-27a 与冠心病冠脉病变的关系

马永 高辉 王明岗 赵斌

冠心病（Coronary heart disease，CHD）是目前全球发病率最高的心血管疾病，其主要是由于冠状动脉出现狭窄以及脑供血不足，导致心肌细胞血液灌注不足或出现器质性病变。如今，随着人们生活质量的逐渐提高，大多人饮食高脂肪、高糖、高热量等食物，运动量亦降低，导致CHD 患病率、死亡率逐年增高，且呈年轻化。目前，CHD 极大威胁到人类生命安全，而冠状动脉发生病变是CHD 发生、发展的病理基础，但其致病基因及作用机制尚不明确［1］。在CHD 众多候选基因中，微小RNAs（MicroRNAs，miRNAs）是研究最深入的基因之一。miRNAs是小分子单链RNA 的一种，常分布于真核细胞中，其主要参与基因转录后细胞的表达、调控。有研究报道，可通过监测miRNAs的表达水平判断动脉粥样斑块是否发生，miRNAs参与心肌肥厚、心律失常及心力衰竭等多种心脏病理、生理过程［2］。miRNA-223一般用于调控内皮细胞、血小板功能，其与血栓性心血管疾病的发生、发展关系密切，可用于评估CHD 患者预后［3］。崔秋利等［4］将miRNA-21应用在小鼠实验中发现，该基因可有效减少心肌细胞死亡面积，还有助于新生内膜增生。miRNA-27a常见于T 细胞、树突状细胞等免疫炎症细胞中，该基因与发生心血管疾病的病理、生理过程方面关联密切［5］。本文旨在探讨miRNA-223、miRNA-21及miRNA-27a与冠心病冠脉病变的关系，现将研究结果报道如下。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料

选取2021 年1 月至2022 年12 月商丘市第一人民医院收治的CHD 患者86 例为观察组，其中男50 例，女36 例；平均年龄（62.52±10.63）岁；平均体质量（22.15±1.36）kg/m2；平均CHD 病程（3.04±1.05）年；冠脉病变类型：急性心肌梗死患者31 例，不稳定型心绞痛29 例，稳定型心绞痛26 例；冠脉病变支数：单支26 例，双支41 例，三支19 例。选取70 名同期院内健康体检者作为对照组。对照组男39 例，女31 例；平均年龄（62.18±9.78）岁；平均BMI（22.51±1.48）kg/m2。两组研究对象性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准同意。研究对象或家属已签署知情同意书。

观察组纳入标准：①均符合CHD 的相关诊断标准［6］；②临床资料齐全；③排除器质性心脏病患者。排除标准：①合并其他恶性肿瘤者；②心理、精神异常者，无法正常交流；③重要器官功能不全者；④2 周内有手术史或创伤史；⑤器质性心脏病者；⑥急、慢性感染者；⑦免疫性疾病或结缔组织疾病。

1.2 方法

外周血miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a检测：所有受试者抽取清晨空腹外周血5 mL，送往实验室，进行离心（3 500 r/min，离心半径10 cm，15 min），采集血清。应用实时荧光定量PCR 技术检测miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a水平，试剂盒均来自无锡天萃生物科技有限公司。严格按照说明书进行操作。

1.3 统计学方法

采用SPSS 21.0 统计软件进行统计分析，计量资料采用（）表示，两组间比较采用t检验；多组间采用F检验；采用Logistic 多因素分析影响CHD冠脉病变的相关因素；以P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平

观察组miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平比对照组高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表达水平比较（）Table 1 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels between the two groups（）

表1 两组血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表达水平比较（）Table 1 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels between the two groups（）

2.2 影响CHD 冠脉病变的相关因素分析

经logistic 多因素分析显示，患有高血压、糖尿病以及miRNA-223＞1.5、miRNA-21＞6.0、miRNA-27a＞5.5 均是影响CHD 冠脉病变的独立危险因素（P＜0.05）。见表2。

表2 影响CHD 冠脉病变的相关因素Table 2 Relevant factors affecting coronary artery disease in CHD

2.3 不同CHD 冠脉病变类型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表达水平

miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平：急性心肌梗死＞不稳定型心绞痛＞稳定型心绞痛，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 不同CHD 冠脉病变类型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表达水平比较（）Table 3 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels among different types of coronary artery lesions in CHD（）

表3 不同CHD 冠脉病变类型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表达水平比较（）Table 3 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels among different types of coronary artery lesions in CHD（）

注：与急性心肌梗死相比较，aP＜0.05。与不稳定型心绞痛相比较，bP＜0.05。

2.4 不同CHD 冠脉病变支数的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表达水平

miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平：三支＞双支＞单支，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 不同CHD 冠脉病变类型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表达水平比较（）Table 4 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels among different types of coronary artery lesions in CHD（）

表4 不同CHD 冠脉病变类型的血清miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a 表达水平比较（）Table 4 Comparison of serum miRNA-223，miRNA-21 and miRNA-27a expression levels among different types of coronary artery lesions in CHD（）

注：与单支组比较，aP＜0.05。与双支相比较，bP＜0.05。

3 讨论

近年来CHD 的发病率、致死率呈逐渐上升趋势，严重威胁到患者的生命健康安全，及时发现并检测其病程进展以及判断冠脉病变程度对CHD的防治至关重要［7］。有报道称，miRNA参与CHD的发生、发展过程，其可通过判断冠状动脉斑块的稳定性与炎症反应的状态，进而评估CHD 的发病风险［8］。

冠状动脉粥样硬化是CHD 的病理基础，而miRNA-223可调控内皮细胞以及血小板的功能，进而影响血栓形成及动脉粥样硬化。miRNA-223通过IGF-1R/PI3K/AKT 信号通路调控血管平滑肌细胞的增殖、迁移，牵张引力的作用使其在血管平滑肌细胞中的表达降低，从而激活PI3K/AKT 信号通路，促进血管平滑肌细胞增殖，参与调控动脉粥样硬化及钙化［9］。有研究称，出现冠状动脉粥样硬化的小鼠外周血中的miRNA-223表达水平明显增加［10］。李童［11］等研究发现，小鼠在完成体外心肌缺血/再灌注试验后，其心脏细胞中miRNA-223表达水平上升，miRNA-223可作为改善心肌缺血损伤的重要因素，且miRNA-223可抑制炎症反应，有助于修复心肌组织。在本次研究中，急性心肌梗死患者的miRNA-223表达水平显著高于不稳定型心绞痛患者与稳定型心绞痛患者。分析原因在于：miRNA-223过度表达可加速内皮细胞凝固，形成血栓，从而加重CHD 冠脉病变程度。

miRNA-21是一种跨膜蛋白基因，其位于基因组的第17 个染色体上。有研究指出，当心肌细胞出现凋亡及缺血/再灌注时，miRNA-21全程参与该过程，且一定程度上可用于保护因缺血造成损伤的心肌细胞［12］。miRNA-21抑制剂会使miRNA-21的表达水平降低，加速过氧化氢所诱导的心肌细胞凋亡；但前体miRNA-21则会提高miRNA-21在外周血中的表达水平，从而达到降低心肌细胞凋亡风险的目的。本研究经logistic多因素分析显示，miRNA-21＞6.0 是影响CHD 冠脉病变的独立危险因素之一。在诸多心血管疾病中，miRNA-21表达异常升高，这提示miRNA-21 可能参与心血管疾病的病理、生理学改变。有学者认为，miRNA-21的异常表达与心肌肥大以及缺血性心肌病等疾病有一定关联［13］。贾敏等［14］学者发现，miRNA-21在相同的心肌缺血时间与再灌注时间中的表达具有个体差异性，如大鼠在缺血30 min、再灌注24 h 时，发现miRNA-21的表达水平会呈现降低趋势，而当小鼠缺血30 min、再灌注24 h 时，miRNA-21的表达水平却呈升高趋势，这说明miRNA-21的表达水平与心肌梗死的病理变化密切相关。

在本研究中，相较于对照组，CHD 患者的miRNA-27a表达水平显著升高；而在CHD 患者中，急性心肌梗死患者的miRNA-27a的表达水平明显高于稳定型心绞痛患者与不稳定型心绞痛患者。miRNA-27a表达过度会抑制组织因子途径抑制物α 表达，进而有效降低组织因子途径抑制物α 的抗凝活性，增加心血管疾病的发生风险［15］。

综上所述，不同冠脉病变CHD 患者miRNA-223、miRNA-21、miRNA-27a表达水平不同，提示以上指标对判断CHD 患者冠脉病变类型具有一定的临床价值。