肺腺癌患者CT征象表现与P53、E-cadherin、TGF-β1蛋白表达的相关性

孟锦,孙兴智,范雪微

(新乡市中心医院/新乡医学院第四临床学院 a.CT室;b.核磁共振室;河南 新乡 453000)

肺癌是目前发病率和死亡率增长最快的一种恶性肿瘤,严重威胁患者的健康及生命安全,根据其发病机制及临床病理可分为腺癌、鳞癌等病理类型,肺腺癌属于非小细胞癌,是一种常见的肺癌[1-2]。目前关于肺腺癌的病理机制尚不十分清楚,多认为肺腺癌的发生、发展与多种生物学因子有关[3]。抑癌基因P53基因突变可促进肿瘤细胞生长及肿瘤细胞增生,在乳腺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌等多种恶性肿瘤中呈异常表达[4]。上皮钙黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)是一种重要的黏附分子,其水平与肺腺癌肿瘤的侵袭和转移密切相关[5]。转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)常被认为是一种负性生长调节因子,能抑制多种正常细胞的增殖,体内TGF-β1表达增多可促进癌细胞生长[6]。胸部计算机断层扫描(computed tomography,CT)可有效反映患者肺部改变情况,其影像学征象有助于肺腺癌的临床诊断,是肺腺癌早期筛查诊断的主要影像学手段[7]。本研究拟探明肺腺癌患者CT征象与P53、E-cadherin、TGF-β1的相关性,以期为肺腺癌的早期诊疗提供参考。

1 对象和方法

1.1 研究对象

选择2020年1月至2022年12月在新乡市中心医院行手术切除的97例肺腺癌患者为研究对象,其中男62例,女35例;年龄42～78(52.36±5.13)岁;TNM分期Ⅰ期37例,Ⅱ期41例,ⅢA期19例;病理学分类原位癌39例,微浸润性腺癌24例,贴壁生长型浸润性腺癌34例;肿瘤直径1～12(4.23±1.37)cm;分化程度高分化26例,中分化41例,低分化30例。纳入标准:(1)具有肺癌临床表现,经辅助影像学检查诊断,术后病理检查确诊为肺腺癌[8];(2)接受外科手术治疗,术中留取癌组织和癌旁组织(距癌组织边缘>3 cm)标本;(3)首次发病的初诊病例,入组前未接受过任何抗肿瘤治疗;(4)临床资料完整,术前具有完整的CT影像资料;(5)患者或其家属签署知情同意书。排除标准:(1)合并其他恶性肿瘤;(2)术前使用过免疫制剂;(3)合并肺炎、肺部先天疾病;(4)有胸部手术史;(5)合并其他器官疾病或全身性疾病。

1.2 研究方法

1.2.1P53、E-cadherin、TGF-β1蛋白检测

采用免疫组化法检测肺癌及癌旁组织P53、E-cadherin、TGF-β1表达情况。手术收集的肺癌及癌旁组织标本用体积分数10%的中性福尔马林缓冲液进行固定,常规脱水处理后用石蜡包埋切片,厚度4 μm。P53、E-cadherin、TGF-β1试剂盒分别购于上海信裕生物科技有限公司、上海将来实业股份有限公司、上海雅吉生物科技有限公司,检测过程严格按照试剂盒说明进行操作。检测结果由2名经验丰富(5 a以上经验)的病理医生独立观察判读后取两名医生的均值为最终结果。定位标准:P53阳性在细胞核定位,E-cadherin阳性在细胞膜定位,TGF-β1阳性在细胞质定位。阳性判读标准:综合考虑阳性细胞染色强度及切片观察细胞中阳性细胞所占百分比,采用半定量法判断是否为阳性表达。(1)阳性细胞染色强度计分标准:未着色记0分,淡黄色记1分,棕黄色记2分,黄褐色记3分;(2)阳性细胞所占百分比计分标准:阳性细胞≤25%记0分,阳性细胞>25%且≤50%记1分,阳性细胞>50%且≤75%记2分,阳性细胞≥75%记3分。阳性细胞染色强度计分与阳性细胞所占百分比计分乘积<3分判断为阴性,≥3分判断为阳性[9]。

1.2.2术前CT检查

采用德国西门子公司的Definition As型64排128层螺旋CT机进行胸部CT扫描,扫描范围为肺尖至隔底,扫描参数管电流100～200 mA,管电压120 kV,螺距1.2,矩阵512×512,重建层厚1 mm,层间距0.5 mm,首先进行CT平扫,然后注射非离子型对比剂碘普罗胺注射液(德国Bayer Vital GmbH公司,国药准字J20180039,规格50 mL∶31.17 g)50 mL,等渗盐水40 mL,延迟扫描时间13～16 s,双期或三期增强扫描。扫描完成后数据传送至PACS系统及后处理工作站进行图像重建,由2名经验丰富(5 a以上经验)的影像科专业医生进行阅片,记录肿瘤内部及边缘结构特征,主要包含:(1)棘突征(结节边缘为尖角状突起,形如小三角,边缘不规则);(2)血管集束征(结节四周大血管及小支气管朝病灶区域聚拢,或直接连接病灶);(3)胸膜凹陷征(病灶与胸膜间存在的线形或幕状及星状阴影);(4)毛刺征(病灶边缘朝四周肺实质延伸的一种不与胸膜粘连、呈放射状且无分支的线条形影像);(5)分叶征(边缘不光滑,有数个弧形突起或凹陷,且呈切迹样变化);(6)空泡征(病灶中残留的含气肺组织或支气管所产生的1～3 mm含气低密度区)。如两医生单独评价结果不一致,则讨论得出一致意见。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 肺腺癌组织与癌旁组织P53、E-cadherin、TGF-β1蛋白表达

肺腺癌组织P53、TGF-β1蛋白阳性表达率高于癌旁组织,E-cadherin蛋白阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05)。见表1。

表1 肺腺癌组织与癌旁组织P53、E-cadherin、TGF-β1蛋白表达比较 [n(%)]

2.2 肺腺癌组织P53表达与CT征象的关系

有棘突征、毛刺征和分叶征CT征象的肺腺癌组织中P53蛋白阳性表达率高于无棘突征、毛刺征和分叶征CT征象患者(P<0.05);有无血管集束征、胸膜凹陷征、空泡征等CT征象的肺腺癌组织中P53蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 肺腺癌组织P53蛋白表达与CT征象的关系 [n(%)]

2.3 肺腺癌组织E-cadherin表达与CT征象的关系

有棘突征、毛刺征CT征象的肺腺癌组织中E-cadherin蛋白阳性表达率低于无棘突征、毛刺征CT征象患者(P<0.05);有无血管集束征、胸膜凹陷征、分叶征、空泡征等CT征象的肺腺癌组织中E-cadherin蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 肺腺癌组织E-cadherin蛋白表达与CT征象的关系 [n(%)]

2.4 肺腺癌组织TGF-β1蛋白表达与CT征象的关系

有血管集束征、毛刺征、分叶征CT征象的肺腺癌组织中TGF-β1蛋白阳性表达率高于无血管集束征、毛刺征、分叶征CT征象患者(P<0.05);有无棘突征、胸膜凹陷征、空泡征CT征象的肺腺癌组织中TGF-β1表达差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4 肺腺癌组织TGF-β1表达与CT征象的关系 [n(%)]

3 讨论

影像学是目前医学发展最快的学科,对肿瘤的诊断具有很大的价值,CT检查对肺癌的早期发现与诊断具有较高的灵敏度和特异度,肿瘤细胞的分子病理改变是CT征象差异形成的基础[10]。肺腺癌分子水平改变可通过临床、病理方面的一些指标反映出来,而肿瘤细胞生长方式、增殖情况及浸润情况的不同,所表现的CT征象也存在一定的差异[10]。本研究中肺腺癌CT征象主要表现为棘突征、血管集束征、胸膜凹陷征、毛刺征、分叶征、空泡征。棘突征是介于分叶征和毛刺征之间的一种较粗大而钝的CT影像,其病理基础为恶性肿瘤浸润;血管集束征是血管到达瘤体内或在瘤体边缘截断或穿过瘤体在CT图像上的表现;胸膜凹陷征是肿瘤与胸膜之间的线形或三角形影像,其病理基础为瘤体方向的纤维化收缩、胸膜无增厚粘连;毛刺征是瘤灶边缘向周围肺实质伸展、不与胸膜相连的放射状无分支的短细条影,其病理基础为癌瘤直接浸润性生长、渗出、增殖;分叶征是肿瘤边缘较为明显的凹凸不平呈分叶状,其病理基础是肿瘤收缩或肿瘤各部分生长速度不一致和分化程度不一致;空泡征是肿块内部出现1～3 mm小透亮区,未被肿瘤组织占据的含气肺组织和肿瘤内小灶性坏死排出后形成,与肿瘤生长方式和增殖速度有关[11]。

由P53基因编码的蛋白质是一种转录因子,控制细胞启动周期,突变后的P53丧失了对细胞生长、凋亡过程的调控,导致细胞增殖失控,引起细胞恶变,可促进肿瘤细胞生长及肿瘤细胞增生[12]。本研究显示肺腺癌组织P53蛋白阳性表达率高于癌旁组织,有棘突征、毛刺征和分叶征CT征象的肺腺癌组织中P53蛋白阳性表达率高于无棘突征、毛刺征和分叶征CT征象者。原因可能是P53蛋白表达增加,癌细胞增长加快,并影响细胞内蛋白降解,这就形成了棘突征、毛刺征和分叶征的分子病理基础[13]。E-cadherin是介导细胞之间相互黏附的钙依赖性跨膜蛋白,起膜固定的作用,其表达与肿瘤的侵袭和转移密切相关,表达降低表明固膜作用丧失,肿瘤细胞更容易发生转移[14]。本研究显示,肺腺癌组织E-cadherin蛋白阳性表达率低于癌旁性组织,有棘突征、毛刺征CT征象的肺腺癌组织E-cadherin蛋白阳性表达率低于无棘突征、毛刺征CT征象者。原因可能是E-cadherin蛋白表达降低导致肿瘤细胞黏附性降低,形成棘突征、毛刺征的分子病理基础[14]。TGF-β1是转化生长因子β超家族的多肽成员,具有调节细胞增殖、分化等多种细胞学功能,体内TGF-β1表达增多可促进癌细胞生长、转移[15]。本研究显示肺腺癌组织TGF-β1蛋白阳性表达率高于癌旁组织,有血管集束征、毛刺征、分叶征CT征象的肺腺癌组织中TGF-β1蛋白阳性表达率高于无血管集束征、毛刺征、分叶征CT征象者。TGF-β1蛋白表达增加,提高了肺腺癌细胞增殖、分化和转移能力[16],形成了血管集束征、毛刺征、分叶征CT征象的分子病理基础。

4 结论

肺腺癌组织P53、TGF-β1蛋白表达增高,E-cadherin蛋白表达降低,P53蛋白表达与棘突征、毛刺征和分叶征有关,E-cadherin蛋白表达与棘突征、毛刺征有关,TGF-β1蛋白表达与血管集束征、毛刺征和分叶征有关。