亚洲前列腺癌患者维生素D受体基因TaqI多态性的Meta分析

侯 祺 李夏西 申 健 彭俊铭 刘希哲 罗荣城 郑少斌

(南方医科大学南方医院泌尿外科，广东 广州 510515)

前列腺癌多发生于50岁以上男性。研究提示，前列腺癌与环境、种族、基因、激素及饮食习惯等多因素有关〔1〕。对前列腺癌患者流行病学研究表明，前列腺癌发生率与体内维生素D浓度有关，而位于细胞核内的维生素D受体(VDR)介导了维生素D对前列腺细胞生长、分化的作用〔2〕。VDR基因TaqI位点(rs731236)较早被发现，因其可影响VDR基因的转录、翻译而被广泛研究。由于种族、地域等差异，国内外关于TaqI位点与前列腺癌关系的研究存在争议。为了全面评价亚洲人群TaqI位点多态性与前列腺癌易感性的关系，本文综合既往相关研究进行Meta分析。

1 资料与方法

1.1 检索策略 检索 Pubmed、EMBase、CBM、CNKI、VIP、万方数据平台，并追溯所有初步纳入文献的参考文献。搜索年限从建库到2011年6月1日。英文搜索策略为(“single nucleotide polymorphism”OR SNP OR polymorphism OR“genetic variation”OR“genetic variant”OR mut*OR“Polymorphism，Single Nucleotide”〔MeSH〕)AND(“prostate cancer”OR“prostate carcinoma”OR“Prostatic Neoplasms”〔MeSH〕)AND(“vitamin D”OR VDR OR“vitamin d”［MeSH〕OR“ergocalciferols”〔MeSH〕)。中文搜索策略:(前列腺癌 OR前列腺肿瘤)AND(基因多态性OR多态性OR SNP)AND(维生素D OR VDR)。手工检索相关杂志、会议论文、学位论文、科技报告。逐一阅读以亚洲人群为试验对象的有关TaqI位点多态性的文献。

1.2 文献纳入和排除标准 纳入标准:①国内外公开发表的研究维生素D受体位点TaqI多态性与前列腺癌易感性的相关临床对照研究，研究设计科学，研究对象有基本构成资料，语言不限;②文献给出病例组及对照组各多态性基因型频率;③病例组病理学确诊为前列腺癌;④对照组为年龄配对、无泌尿系症状的健康人群;⑤病例组与对照组人群基因频率符合Hardy-Weinberg遗传平衡。排除标准:①重复发表的文献;②对照组人群来源不清，特别是患前列腺增生、前列腺炎等患者;③只分析基因的杂合性，未给出多态性基因频率;④非临床对照研究。

1.3 数据提取 由第一、第二作者独立阅读文题、摘要，对可能符合纳入标准的试验进一步阅读全文，对纳入有矛盾的试验由第三作者与前二位作者共同讨论决定。从每个纳入的文献中提取以下数据:第一作者、出版年份、对象人群、检测方法、病例组和对照组基因型频率。

1.4 统计学分析 采用RevMan5.0.0进行Meta分析，Stata11.0软件进行Egger和Begg检验。各研究的异质性由Q检验和I2值评价。如I2＜50%，选用固定效应模型进行Meta分析;如I2＞50%，则采用随机效应模型。Egger检验和Begg检验评价发表偏倚。

2 结果

2.1 文献检索结果 共检索到英文文献98篇、中文文献8篇(截至2011年5月20日)，逐一阅读全文筛选与VDR TaqI位点有关文献，最后共纳入7篇，文献的基本特征见表1，试验设计均为病例对照研究，累计样本量为1 766例，其中病例组801例，对照组965例。

表1 纳入文献的基本特征(n)

2.2 Meta分析结果 等位基因T对t(图1)、基因型TT/Tt对tt(图2)、TT 对 Tt/tt(图3)，各基因型 TT、Tt、tt之间与前列腺癌易感性的OR值(表2)。Meta分析显示，纳入的7篇文献研究间未见明显异质性(Q=5.06，P=0.54，I2=0%)，故采用倒方差法为各独立研究赋予权重并进行合并。固定效应模型未见等位基因T对t的与前列腺癌易感性有显著性关联(OR=1.16，95%CI=0.93 ～1.46，P=0.19)。基因型 TT/Tt对 tt、TT对Tt/tt各合并OR值均大于1，但95%可信区间(CI)包含1，且P＞0.05，表明亚洲人群前列腺癌发病与TaqI的等位基因T与t，基因型TT、Tt与tt均无显著性关联。

2.3 发表偏倚评估 采用Egger检验和Begg检验分别评价入选7个试验的发表偏倚(图4，图5)。在Egger法回归分析中，截距为－0.76，P＞|t|指标为0.479;且由图4可见，7个点分布均匀对称，未见明显发表偏倚。Begg检验显示 Pr＞|z|=0.548，且图5点分布对称，同样未见明显发表偏倚。

表2 TaqI多态性与前列腺癌易感性的Meta分析结果汇总

图1 等位基因T对t的森林图

图2 基因型TT/Tt对tt的森林图

图3 基因型TT对Tt/tt的森林图

图4 Egger发表偏倚评价图

图5 Begg发表偏倚评价图

3 讨论

前列腺癌是由遗传和环境等多因素共同致病的复杂疾病。流行病学研究显示，维生素D〔1，25(OH)2D3〕缺乏可增加前列腺癌的发生率〔10〕。临床上也有报道将活性维生素D作为预防前列腺癌复发的辅助治疗〔11〕。进一步离体实验表明维生素D及其类似物能抑制前列腺细胞生长、分化〔2〕。VDR蛋白在健康前列腺细胞和前列腺癌细胞中都有表达，作为甾体激素受体超家族成员介导了1，25(OH)2D3的抗肿瘤作用。VDR蛋白与1，25(OH)2D3结合形成异二聚体，与VDR基因反应原件(react element)一起调节 p21、p27、c-fos、c-myc 等基因的转录〔12〕。多态性位点 TaqI位于染色体12q13，VDR基因第9号外显子，多态性变化介导同义突变，导致该多态性影响了VDR蛋白转录效率〔13〕和mRNA的稳定性〔14〕，由此改变前列腺癌易感性。

前列腺癌的生物学行为极其复杂，发生率在不同种族和地区差异很大。1996年Taylor等〔15〕最早对258例美国白人(96例前列腺癌和162例健康对照)VDR TaqI位点多态性研究发现，基因型tt相较TT/Tt携带者不易患前列腺癌(OR=0.32，95%CI=0.15～0.75，P＜0.01)。但2006年 Andersson等〔16〕的研究得出不同结果，通过检测瑞典人(137例前列腺癌和176例健康对照)VDR TaqI位点多态性与前列腺癌易感性发现两者并不存在显著关联。最近Bonilla等〔17〕运用全基因组SNP芯片检测的方法，研究550例非裔美国人(253例前列腺癌和297例健康对照)基因多态性与前列腺癌易感性的关系发现，VDR TaqI等位基因t是前列腺癌发生的临界危险因素(OR=1.3，95%CI=1.0～1.8，P=0.04)。前列腺癌易感性与TaqI位点多态性的关系在亚洲人群中研究较少，由于亚洲人群均由黄种人(蒙古人)构成，具有人种、地域和基因频率的特殊性。开发具有亚洲人群特异性的前列腺癌基因标记物，对肿瘤个体化诊断和治疗有重大研究前景。本研究虽未发现TaqI位点与前列腺癌的相关性，但VDR调控机制复杂，目前尚未完全清楚。VDR基因多态性仅是调控VDR的一个因素，而VDR基因多态性并不取决于单个位点的多态性，TaqI位点仍可通过连锁不平衡影响其他位点多态性对VDR基因的表达和功能〔15〕，推测TaqI位点与其他位点多态性可共同对VDR的发挥复杂网络调控作用。故下一步的研究可定为于TaqI位点和其他位点多态性共同作用与前列腺癌易感性之间的关联。

既往的研究对TaqI与前列腺癌是否相关仍有争论，本研究利用系统评价方法，通过搜集既往同类型研究，根据研究可靠性赋予不同权重，定量合并效应值，达到类似于多中心、大样本临床对照试验的效果，得出更科学、可靠的结论。但本研究的Meta分析也存在众多限制。在搜集同类型的独立研究过程中，不能得到每个研究对象的确切资料(紫外线暴露剂量、用药情况、维生素D摄入剂量及饮食习惯)，影响对前列腺癌与各因素关系的深入挖掘，并限制异质性来源的分析;发表偏倚也需要特别关注，由于研究者往往倾向发表有显著性结论的研究，导致Meta分析得出不真实的结论。本研究虽经Egger和Begg检验未发现明显发表偏倚，但考虑到纳入试验数较少，发表偏倚仍存在;另外纳入文献的质量和真实程度也影响Meta分析最终的结果。本研究虽未得出TaqI与前列腺相关性的结论，但考虑到样本量和调控机制问题，更确切的结论有待进一步研究说明。

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