苹果渣多酚对高脂大鼠体重及血脂的影响

葛 蕾

（淄博市食品药品检验所，山东淄博255000）

高血脂是动脉粥样硬化和心血管病发生发展的重要因素，世界各国在高血脂及其并发症的治疗方面，每年的投入高达数万亿美元[1]。因此，开发具有降脂作用的天然保健食品，对保护人体健康具有重要的现实意义。研究发现[2]，苹果渣中含有多酚类化合物。苹果多酚是苹果中所含多元酚类物质的通称，主要包括绿原酸、儿茶素、表糖儿茶素、苹果缩合丹宁、根皮苷、槲皮苷、原花青素等。药理研究表明，苹果多酚具有预防龋齿、高血压、过敏反应，抗动脉粥样硬化、阻碍紫外线吸收等多种保健功能，同时还具有抗氧化、消臭、保鲜、护色、防止维生素损失等作用[3-5]。苹果多酚主要存在于果皮中，苹果加工企业排出的果渣中果皮较多，所以果渣中多酚含量非常丰富。本研究采用高脂大鼠为模型，给予相应剂量的苹果渣多酚，并以降血脂常用药物非诺贝特设立阳性对照组，用药理学的方法探讨苹果渣多酚对高脂大鼠血清中脂质代谢相关指标的影响，并与药物作对比，从而为苹果渣多酚的进一步开发和利用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

红富士苹果 产自沂源燕崖；苹果渣多酚 实验室自制；非诺贝特胶囊 广东先强药业有限公司，批号110504；SD雄性大鼠60只 体重160～190g，山东鲁抗医药股份有限公司；血清甘油三酯（TG）、血清总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）试剂盒 保定长城临床试剂有限公司。

超声洗涤仪 昆山市超声仪器有限公司；HHS-4s电热恒温水浴锅 上海南阳仪器有限公司；754N紫外可见分光光度计 上海精密科学仪器有限公司；TGL-16C高速离心机 上海安亭科学仪器厂；TD12001电子天平 北京塞多利斯天平有限公司；冷冻干燥机 上海冷冻干燥仪器厂；旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂。

1.2 实验方法

1.2.1 苹果渣多酚的制备 苹果清洗→破碎榨汁→果渣冷冻干燥→加70%乙醇超声提取2次→提取液离心→上清液减压回收→苹果渣多酚粗提物→70%乙醇溶解→XDA-5型大孔树脂纯化→解析液减压浓缩→浓缩液冷冻干燥→苹果渣多酚（经Folin-酚法[6]测定纯度78.4%，以总酚计）。

1.2.2 饲料诱导高脂大鼠模型的建立 将60只大鼠适应性喂养5d后，随机分为6组，每组10只。正常对照组给予基础饲料，高脂对照组（阴性对照组）、非诺贝特组（阳性对照组）和苹果渣多酚3个剂量组的大鼠饲喂高脂饲料[7]（基础饲料84.5%，猪油5%，蛋黄粉10%，胆盐0.5%）。大鼠饲喂高脂饲料14d后，空腹12h，眼眶取血测定血清甘油三酯（TG）、血清总胆固醇（TC）水平，以确定高脂大鼠模型的建立。

1.2.3 动物给药 高脂大鼠模型建立后，每天9∶00按不同剂量对大鼠进行灌胃。苹果渣多酚低、中、高三个剂量组给药量分别为15、30、60mg/kg·bw，非诺贝特组给药量为30mg/kg·bw。根据给药量将苹果渣多酚用3mL蒸馏水溶解灌胃，正常对照组和高脂对照组灌胃等体积蒸馏水，连续28d。实验期间大鼠自由饮水进食，饲养环境温度为室温。

1.2.4 实验指标

1.2.4.1 苹果渣多酚对大鼠体重、肝脏的影响 实验大鼠随机分组后，称初重，灌喂苹果渣多酚和非诺贝特28d后，称终重。麻醉解剖大鼠，取出肝脏，进行病理检查。

1.2.4.2 苹果渣多酚对大鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、AI的影响 灌喂苹果渣多酚和非诺贝特28d后，禁食12h，麻醉解剖大鼠，心脏采血，分离血清，分别测定TG、TC、HDL-C、LDL-C，以上测定指标均严格按照试剂盒说明书进行操作。动脉粥样硬化指数（AI）计算公式如下：

AI=（TC－HDL-C）/HDL-C

式中，TC为血清总胆固醇（mmol/L）；HDL-C为高密度脂蛋白胆固醇（mmol/L）。

1.3 数据处理

采用SPSS 13.0软件中one-way ANOVA进行处理和显著性检验，结果以均数±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 高脂大鼠模型的建立

大鼠饲喂14d后，称重，空腹12h，眼眶取血测定TC、TG水平，以确定动物模型的建立，结果见表1。

表1 苹果渣多酚饲喂前大鼠血脂水平（±s，n=10）Table 1 Serum lipid level of rat before fed apple pomace polyphone（±s，n=10）

表1 苹果渣多酚饲喂前大鼠血脂水平（±s，n=10）Table 1 Serum lipid level of rat before fed apple pomace polyphone（±s，n=10）

注：与正常对照组相比：**，p<0.01，差异极显著；*，p<0.05，差异显著；与高脂对照组相比：##，p<0.01，差异极显著；#，p<0.05，差异显著。表2～表4同。

组别 TG（mmol/L） TC（mmol/L）正常对照组 0.40±0.1 1.29±0.69高脂对照组 0.68±0.25** 2.88±0.45**苹果渣多酚低剂量组 0.65±0.26** 2.90±0.882**苹果渣多酚中剂量组 0.63±0.33** 2.84±0.96**苹果渣多酚高剂量组 0.66±0.32** 2.86±0.58**非诺贝特组 0.64±0.22** 2.85±0.63**

由表1可见，5个高脂饲料组的血脂水平均显著高于正常对照组（p＜0.01），说明高血脂大鼠模型建立成功。

2.2 苹果渣多酚对大鼠体重、肝脏的影响

表2 苹果渣多酚对大鼠体重的影响（±s，n=10）Table 2 Effect of apple pomace polyphone on rat weight（±s，n=10）

表2 苹果渣多酚对大鼠体重的影响（±s，n=10）Table 2 Effect of apple pomace polyphone on rat weight（±s，n=10）

组别 初重（g） 终重（g）正常对照组 167±8 397±22高脂对照组 166±7 427±17**苹果渣多酚低剂量组 167±6 409±24苹果渣多酚中剂量组 166±10 405±24#苹果渣多酚高剂量组 167±8 404±23#非诺贝特组 168±7 419±20

由表2可以看出，灌胃之前，各实验组之间大鼠体重无显著差异（p＞0.05）；实验结束时，苹果渣多酚中、高剂量组大鼠体重与高脂对照组相比，有显著差异（p＜0.05），说明苹果渣多酚能明显抑制大鼠体重的增加。非诺贝特组大鼠体重与高脂对照组相比，无显著差异（p＞0.05）。这也反映出在控制体重方面，苹果渣多酚的作用大大优于非诺贝特。

对大鼠肝脏进行病理检查发现高脂对照组大鼠肝脏呈黄色，已呈明显脂肪变化（正常对照组大鼠肝脏呈褐色）。苹果渣多酚各剂量组和非诺贝特组病变均轻于高脂对照组，但苹果渣多酚高剂量组，大鼠肝脏颜色最接近正常对照组。表明苹果渣多酚对高脂饲料致大鼠脂肪肝形成有阻止作用，效果优于非诺贝特，并且和剂量有一定相关性。

2.3 苹果渣多酚对大鼠TG、TC的影响

由表3可知，非诺贝特组和苹果渣多酚高剂量组降TG效果最好。苹果渣多酚中、高剂量组TG含量与高脂对照组之间存在显著差异（p＜0.05）。随着苹果渣多酚剂量增加，TG含量呈下降趋势，苹果渣多酚剂量越大，降TG效果越好。

从TC指标可以看出，苹果渣多酚低、中剂量组、非诺贝特组与高脂对照组之间均存在极显著性差异（p＜0.01）。随着苹果渣多酚剂量增加TC呈上升趋势，说明苹果渣多酚与降低TC浓度之间存在量效关系，在此范围内，苹果渣多酚低剂量组降TC效果最好。

表3 苹果渣多酚对大鼠血清TG、TC的影响（±s，n=10）Table 3 Effect of apple pomace polyphone on serum TG、TC levels of ra（t±s，n=10）

表3 苹果渣多酚对大鼠血清TG、TC的影响（±s，n=10）Table 3 Effect of apple pomace polyphone on serum TG、TC levels of ra（t±s，n=10）

组别 TG（mmol/L） TC（mmol/L）正常对照组 0.45±0.46 1.45±0.10高脂对照组 0.73±0.18* 3.56±0.65苹果渣多酚低剂量组 0.54±0.17 2.73±0.65##苹果渣多酚中剂量组 0.48±0.16# 2.86±0.49##苹果渣多酚高剂量组 0.46±0.09# 2.98±0.67非诺贝特组 0.45±0.07## 2.84±0.55##

2.4 苹果渣多酚对大鼠HDL-C、LDL-C及AI的影响

表4 苹果渣多酚对大鼠血清HDL-C、LDL-C及AI的影响（±s，n=10）Table 4 Effect of apple pomace polyphone on serum HDL-C，LDL-C and AI levels of ra（t±s，n=10）

表4 苹果渣多酚对大鼠血清HDL-C、LDL-C及AI的影响（±s，n=10）Table 4 Effect of apple pomace polyphone on serum HDL-C，LDL-C and AI levels of ra（t±s，n=10）

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从HDL-C指标看，苹果渣多酚各剂量组和非诺贝特组均能显著提高HDL-C含量，其中苹果渣多酚低剂量组效果最好，与高脂模型组之间的差异达到了极显著水平（p＜0.01）。说明苹果渣多酚可以有效提高HDL-C的含量，并且苹果渣多酚对提高HDL-C的含量有一定的量效关系，即随着剂量的增加，HDL-C呈下降趋势。

从LDL-C指标看，苹果渣多酚各剂量组和非诺贝特组均与高脂对照组之间存在极显著性差异（p＜0.01），其中苹果渣多酚中剂量组降低LDL-C含量效果最好。

从AI指标看，高脂对照组与正常对照组之间存在极显著性差异（p＜0.01），这进一步表明高脂大鼠模型建立成功。苹果渣多酚各剂量组和非诺贝特组均与高脂对照组之间存在极显著性差异（p＜0.01），其中苹果渣多酚低剂量组对降低动脉粥样硬化效果最好。苹果渣多酚各剂量组对降低AI有一定量效关系，即随着苹果渣多酚剂量增加AI呈上升趋势。

3 讨论与结论

现代科学已经证实，所有降血脂的药物对人类的身体都有副作用[8]。以本实验所用的非诺贝特为例，长期服用，不仅会导致人体肝、肾功能损害，甚至还会致癌、致畸。苹果渣多酚提取物是天然产物，安全无毒，如能开发成降血脂的保健食品，未来市场前景将非常广阔。

大量研究证实，脂代谢紊乱和动脉粥样硬化密切相关[9]。其脂质变化包括低密度脂蛋白（LDL）、TG、TG和高密度脂蛋白（HDL）[10]。当血清LDL浓度升高时动脉壁内脂质，特别是胆固醇酯沉积增多，可引起中膜平滑肌组织大量增殖，促进动脉粥样硬化的发生、发展[11]。HDL的作用与LDL的完全相反。HDL参与胆固醇的逆向转运有效地摄取外周多余的胆固醇，抑制细胞对LDL-C的摄取，在卵磷脂胆固醇脂酰基转移酶（LCAT）作用下转运至肝脏代谢从而减少胆固醇在血管壁内沉积[12]。因此血清TC含量和AI值与冠心病发病率呈正相关。

本实验所测定的四个指标中，TC、HDL-C和LDL-C三个指标，苹果渣多酚的作用都优于非诺贝特。TG指标，非诺贝特略优于苹果渣多酚。结果表明，苹果渣多酚能明显降低高脂血症大鼠血清TC和TG的含量，提高HDL-C值，降低LDL-C含量，从而降低AI值。因此苹果渣多酚具有降血脂、减肥以及预防和缓解动脉粥样硬化的作用。

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