新生儿缺氧缺血性脑病血清中VEGF MMP-2和MMP-9蛋白水平的变化及其临床意义

新生儿缺氧缺血性脑病血清中VEGF MMP-2和MMP-9蛋白水平的变化及其临床意义

沈永杰

商丘医学高等专科学校商丘476100

【摘要】目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿血清中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9蛋白水平的变化及其临床意义。方法入组112例HIE患儿，其中轻度49例，中度34例，重度29例，采用酶联免疫吸附试验检测这些HIE患儿出生后72 h内血清VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平，同时比较不同程度HIE患儿血清VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平的差异，并以50例足月正常新生儿作为对照。结果轻度、重度、重度HIE患儿血清中VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平均高于足月正常新生儿，差异有统计学意义(P<0.05)。不同程度HIE患儿血清中VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平比较差异均有统计学意义(P<0.05)，且表达水平均随疾病严重程度的进展而升高。结论VEGF、MMP-2和MMP-9可能参与了HIE的疾病发生发展过程，且检测血清中三者的表达水平可用于诊断HIE或评估其预后。

【关键词】新生儿；缺氧缺血性脑病；血管内皮生长因子；基质金属蛋白酶-2；基质金属蛋白酶-9

【中图分类号】R747.9

新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy，HIE)是新生儿高发的引起神经系统功能障碍性疾病，严重者可造成新生儿神经系统的永久性损伤[1]。越早诊断并及时进行治疗，HIE的预后越好，因此，寻找一种微创，甚至无创的能够早期诊断HIE的方法成为了研究热点[2]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)、MMP-9均是已被证实的参与了脑组织损伤的细胞因子，但是血清中三者的表达水平与HIE疾病严重程度的关系尚未被明确比较，作者采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测HIE患儿出生后72 h内血清VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平，同时比较不同程度HIE患儿血清VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平的差异，并以足月正常新生儿作为对照，以期为HIE发生机制的探讨及早期诊断提供一定的数据参考。

1资料与方法

1.1一般资料入组我院2008-01—2014-12收治的112例HIE患儿，均符合中华医学会儿科分会新生儿学组于2005年制定的HIE诊断标准[3]，其中男72例，女40例；出生体质量2.5～4.0(3.3±0.6)g；出生胎龄37～42(38.4±3.3)周；参考文献[3]制定的病情严重程度评定标准分为轻度49例，中度34例，重度29例；Apgar评分均≤7分；排除巨大儿、足月小样儿、糖尿病母亲儿、产伤史儿、非窒息所致颅内出血儿等。选取我院出生的50例足月正常新生儿作为对照，其中男33例，女17例；出生体质量2.5～4.4(3.6±0.5)g；出生胎龄37～42(39.7±2.7)周；Apgar评分均≥8分；母亲妊娠期身体健康；排除伴有窒息、畸形及其他神经系统疾病新生儿。各组新生儿的性别、出生体质量、胎龄等具有可比性(P>0.05)。本研究获得医院医学伦理委员会的审查批准，新生儿家属均签署知情同意书。

1.2ELISA法检测新生儿血清VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平 所有新生儿均于出生后72 h内采集静脉血3 mL，置于肝素管内，4 ℃ 45 000 r/min离心5 min，取适量上清液保存于-20 ℃冰箱中待测。所有上清液标本均采用ELISA法进行VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平检测，操作过程严格按照试剂及试剂盒相关说明进行。研究所用抗体及试剂盒均购自北京中杉金桥生物工程有限公司。

1.3统计学分析采用SPSS 17.0进行数据处理，不同程度HIE患儿及足月正常新生儿血清VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平之间的总体比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验，以α=0.05为检验水准。

2结果

轻度、重度、重度HIE患儿及足月正常新生儿血清中VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平总体比较差异均有统计学意义(F=149.345、123.741、227.610，P<0.05)。轻度、重度、重度HIE患儿血清中VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平均高于足月正常新生儿，差异有统计学意义(P<0.05)。不同程度HIE患儿血清中VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平比较差异均有统计学意义(P<0.05)，且表达水平均随疾病严重程度的进展而升高。见表1。

表1　不同新生儿血清中VEGF、MMP-2和

MMP-9蛋白水平比较　( ± s，ng/mL)

表1　不同新生儿血清中VEGF、MMP-2和

组别nVEGF(ng/mL)MMP-2(ng/mL)MMP-9(ng/mL)正常新生儿3081.64±10.21123.99±12.2078.32±13.41轻度15158.34±22.09495.48±87.69316.27±35.22中度17225.92±45.37654.13±100.27389.56±56.78重度13317.28±55.66935.97±137.86443.26±79.04

注：轻度、重度、重度HIE患儿及足月正常新生儿血清中VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平总体比较，F=149.345、123.741、227.610，P均<0.05；各组VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白水平两两比较，P均<0.05

3讨论

HIE是发生于围产期的缺氧性窒息导致的一种脑部缺氧缺血性损伤，在围产期神经系统疾病中发病率相对较高，轻度HIE仅出现功能性损伤，经对症处理后恢复或自行恢复，而严重的HIE则可造成新生儿的永久性的神经系统损伤，是新生儿致死、致残的重要因素[1-2,4]。HIE的临床表现主要为肌张力异常、意识障碍、惊厥等，其发病机制非常复杂，可能与新生儿机体的炎症反应、自由基过剩、钙超载、线粒体损伤、细胞凋亡等有关[4-6]。

VEGF是机体内广泛存在的一种调节性蛋白，对血管内皮细胞的增殖具有促进作用，VEGF在乳腺癌、肝癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌等实体瘤均被检测出高水平表达，这可能与肿瘤组织的形成需要血液供应，而VEGF是血管形成的重要影响因素有关；在老年痴呆、器官或组织缺血再灌注损伤、心肌梗死、脑梗死等多种疾病中也均被检测出高水平表达，这可能是因为在这些疾病的形成过程中均伴随着机体组织的损伤，而机体的自我修复能力促进组织自我修复的过程中需要新生血管的帮助，VEGF的高表达使其成为可能[5-6]。布兰娜等[7]的研究不但发现VEGF在HIE患儿血清中存在高表达，还发现VGEF的表达水平与HIE患儿的疾病严重程度有关，随着疾病严重程度的加重，VEGF表达水平逐渐升高。本文结果显示，轻度、重度、重度HIE患儿血清中VEGF蛋白水平均高于足月正常新生儿；HIE患儿血清中VEGF蛋白表达水平随疾病严重程度的进展而升高。

MMP-2是MMP家族中研究较为深入和明确的一种，其作用是降解细胞外基质中的各种成分，特别是IV型胶原蛋白。刘恒等[8]研究发现，HIE患儿出生后1、3、7 d血清MMP-2水平均高于正常新生儿，3 d时达到高峰，7 d时出现一定程度的下降；不同程度的HIE患儿相同时段的血清MMP-2水平差异有统计学意义，且随着疾病严重程度的进展，MMP-2水平逐渐上升，提示MMP-2在HIE的发生发展过程中可能发挥一定的作用，其水平检测可用于评估HIE疾病的严重程度。本文结果显示，轻度、重度、重度HIE患儿血清中MMP-2蛋白水平均高于足月正常新生儿；HIE患儿血清中MMP-2蛋白表达水平随疾病严重程度的进展而升高。

MMP-9同样是MMP家族中的一员，以酶原形式分泌，主要来自于巨噬细胞、结缔组织细胞及部分肿瘤细胞，通过破坏细胞外基质中的胶原蛋白，破坏细胞屏障，从而增加血管通透性，少量的MMP-9能够维持细胞内外物质的正常的运转。另外，MMP-9在血管形成、关节炎、伤口愈合、脑组织损伤等病理生理过程中存在异常高表达，并发挥着重要作用[9]。目前，研究较多的是MMP-9在肿瘤发生中的作用。但是关于MMP-9与新生儿HIE的关系研究也有报道。刘恒等[8]研究发现，HIE患儿出生后1、3、7 d血清MMP-9水平均高于正常新生儿，3 d时达到高峰，7 d时出现一定程度的下降；不同程度的HIE患儿相同时段的血清MMP-9水平差异有统计学意义，且随着疾病严重程度的进展，MMP-9水平逐渐上升，提示MMP-9在HIE的发生发展过程中可能发挥一定的作用，其水平检测可用于评估HIE疾病的严重程度。本文结果显示，轻度、重度、重度HIE患儿血清中MMP-9蛋白水平均高于足月正常新生儿；HIE患儿血清中MMP-9蛋白表达水平随疾病严重程度的进展而升高。

综上所述，VEGF、MMP-2和MMP-9可能参与了HIE的疾病发生发展过程，且检测血清中三者的表达水平可用于诊断HIE或评估其预后，但是三者在HIE疾病进展中的具体作用及三者之间的相互关系尚需进一步深入研究探讨。

4参考文献

[1] 黄艳春,肖强.神经节苷酯辅治新生儿缺氧缺血性脑病近期疗效及对神经功能修复的影响[J].现代中西医结合杂志,2015,24(5):511-513.

[2] 易波,刘康玲,沈红.缺氧缺血性脑病患儿血清sICAM-1和NSE水平变化及意义[J].山东医药,2014,54(47):54-55.

[3]中华医学会儿科分会新生儿学组.新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准[J].中华儿科杂志,2005,43(8):584.

[4] 田发书.新生儿缺氧缺血性脑病血清sICAM-1和IL-6水平探讨[J].中国实用神经疾病杂志,2014,17(15):75-76.

[5] 徐双云,徐家丽,沈怀云,等.缺氧缺血性脑病新生儿血浆中血管内皮生长因子动态变化的临床意义[J].蚌埠医学院学报,2009,34(8):669-671.

[6] 楚荷莹,白勇,杨睿,等.恩度联合顺铂对老年晚期非小细胞肺癌患者血清MMP-2和VEGF水平的影响[J].肿瘤基础与临床,2014,27(4):300-301.

[7] 布兰娜,郑彦强,牛丽辉.新生儿缺氧缺血性脑病血清中MMP-9和VEGF变化的意义[J].中国热带医学,2014,14(11):1 399-1 400.

[8] 刘恒,陈晶,李晓华,等.缺氧缺血性脑病新生儿血清MMP-9、MMP-2动态变化及意义[J].临床儿科杂志,2009,27(9):842-845.

[9] 曹敏,卢宁.CD147与MMP-2和MMP-9在乳腺癌中的研究进展[J].医学综述,2015,21(7):1 209-1 211.

(收稿2014-12-09)