浸润性肺腺癌中Aurora-A和基质金属蛋白酶-9的表达

张永强 任 海 郝文波 潘冠龙 张星焱

(齐齐哈尔医学院附属第三医院胸外科，黑龙江 齐齐哈尔 161000)

浸润性肺腺癌中Aurora-A和基质金属蛋白酶-9的表达

张永强 任 海 郝文波 潘冠龙 张星焱

(齐齐哈尔医学院附属第三医院胸外科，黑龙江 齐齐哈尔 161000)

目的应用免疫组化SP法检测浸润性肺腺癌中Aurora-A激酶(Aurora-A)和基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达特征，分析二者在不同临床病理特征中的表达意义。方法确诊为浸润性肺腺癌51例为观察组，确诊为原位腺癌21例为对照组，收集距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性的肺组织20例为正常对照组，均留取术后蜡块组织，应用免疫组化SP法检测3组Aurora-A和MMP-9表达，分析其在不同临床病理特征中的差别。结果3组Aurora-A和MMP-9表达阳性率差异显著(P<0.01)。观察组Aurora-A和MMP-9表达阳性率与肿瘤脉管累犯和转移密切相关。Aurora-A表达阳性率与肿瘤增殖指数和最大径密切相关。相关分析显示观察组Aurora-A和MMP-9表达呈正相关。结论Aurora-A和MMP-9在浸润性肺腺癌中的表达升高是促进肿瘤形成和进展的重要因素。Aurora-A和MMP-9具有一定正向协同作用。

肺腺癌；Aurora-A激酶；基质金属蛋白酶-9；免疫组化

肺腺癌病变形成具有腺瘤样增生-原位腺癌-微浸润性腺癌-浸润性腺癌的趋势性变化。在浸润性腺癌形成后，与肿瘤生成相关的癌基因和转移相关的基因有明显变化，这对病变的形成和发展有明显促进作用〔1,2〕。Aurora-A激酶(Aurora-A)是新发现的与细胞有丝分裂密切相关的基因，是调节中心体、微管功能的丝/苏氨酸激酶，可以引起中心体扩增、染色体不稳定及非整倍体形成。Aurora-A高表达可以促进肿瘤的发生，也可能对转移有一定的调节作用〔3,4〕。基质金属蛋白酶(MMP)-9是MMPs家族中的重要成员，高表达时可以引起细胞外基质的降解，促进肿瘤细胞的迁移〔5,6〕。本文关注Aurora-A和MMP-9在浸润性肺腺癌中的表达特征，探讨二者在不同临床病理特征中的表达差异及相关性，分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1临床资料 2012年1月至2015年12月齐齐哈尔医学院附属第三医院确诊浸润性肺腺癌51例作为观察组，留取术后的蜡块组织，并经病理医师再次阅片确认，纳入均符合肺腺癌国际多学科分类中的诊断标准，其中男28例，女23例，年龄35～87岁，平均57.3岁。同期确诊为原位腺癌21例作为对照组，其中男11例，女10例，年龄38～80岁，平均59.2岁。距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性的肺组织20例为正常对照组，其中男10例，女10例，年龄40～81岁，平均56.8岁。3组一般临床资料无明显差别，具有可比性。

1.2Aurora-A和MMP-9表达检测 术后组织均应用甲醛溶液固定>12 h后常规取材，均由病理医师完成，脱水、石蜡包埋、切片，应用免疫组化SP法检测Aurora-A和MMP-9表达、二氨基联苯胺(DAB)显色，操作均按说明书进行，做好质控工作。

1.3Aurora-A和MMP-9的判读 Aurora-A和MMP-9表达的阳性部位是细胞质，出现棕黄色颗粒为阳性细胞。选择阳性染色集中的上皮细胞分布区域的3个400倍视野进行计数，取平均值，最终结果以阳性率<10%定为阴性，≥10%定为阳性。

1.4统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行χ2检验，线性相关分析。

2 结 果

2.13组Aurora-A和MMP-9阳性表达的比较 正常对照组、对照组和观察组中Aurora-A和MMP-9的表达有增高趋势(P<0.01)。见表1。

2.2Aurora-A和MMP-9在观察组不同临床病理特征中的比较 观察组中Aurora-A和MMP-9表达阳性率与肿瘤脉管累犯和转移密切相关。Aurora-A表达阳性率与肿瘤最大径和增殖指数密切相关(P<0.05)。见表2。

2.3观察组中Aurora-A和MMP-9的相关性 Aurora-A和MMP-9呈正相关(r=0.41，P=0.030 1)。

表1 3组Aurora-A和MMP-9阳性表达的比较〔n(%)〕

表2 Aurora-A和MMP-9在观察组不同临床病理特征中阳性表达的比较〔n(%)〕

3 讨 论

肺腺癌发生常常是周围型，很少发生于中央，很少有空洞，其病理特征是具有腺样分化或有黏液产生的癌，表现为腺泡样、乳头样、细支气管肺泡样〔7〕。病变进展中相关基因和表达蛋白有明显变化。Aurora-A基因定位于20q13.2上，由403个氨基酸排列组成，其一级结构含两个结构域，催化区氨基酸序列高度保守，内有活化环，降解框，参与调节激酶活性及激酶的降解〔8〕。Aurora-A激酶的活性受抑制会引起单极纺锤体形成，使染色体不能正确分离〔9〕。Aurora-A过高表达可以促进肿瘤形成，并继发肿瘤性病变的进展〔10〕。Aurora-A高表达不仅是通过基因的扩增进行调控，还可能是转录过程激活、蛋白分解阻滞等。Aurora-A还可能通过使底物发生磷酸化发挥调节机制，这些底物包括转录相关酸性卷曲蛋白(TACC)、xklp2靶蛋白(TPX)2、蛋白磷酸酶(PP)1和Ajuba基因等〔11〕。Aurora-A与这些底物间均有相互调控作用，如PP1可以去磷酸化Aurora-A，引起Aurora-A的活性降低；Ajuba可以激活Ajuba-A，对于细胞有丝分裂G2/M期转换是必需的，保证细胞进入正常的有丝分裂期。而MMP-9转移相关蛋白，是MMPs家族中的重要成员，其可以由肿瘤细胞产生，尤其是恶性程度高的肿瘤细胞产生的量可能更多〔12〕。MMP-9在肿瘤细胞中的表达部位是细胞质，可以对细胞外基质和基底膜进行有效的溶解，使肿瘤转移的屏障明显破坏，引发肿瘤细胞离开原发灶，形成转移灶〔13,14〕。

本研究提示Aurora-A和MMP-9在上皮细胞恶性转化的病变形成中具有明显的促进作用。二者的作用与癌基因相似。Aurora-A和MMP-9高表达可以促进肿瘤细胞的脉管侵犯，对肿瘤细胞进入脉管起一定的促进作用，此时肿瘤细胞随着血液和淋巴液的流动，易于使肿瘤细胞在其他部位进行定植。本文提示Aurora-A高表达可以促进肿瘤细胞的增生和繁殖，使肿瘤细胞生长活跃，肿瘤细胞的数量明显增多，体积增大，肿瘤的恶性进展明显。本文提示Aurora-A和MMP-9二者具有正向协同作用。王晓霞等〔15〕对食管癌细胞中Aurora-A和MMP-9的表达进行研究，建立了Aurora-A高表达的稳定细胞系，且Aurora-A高表达能增加食管癌细胞的体外侵袭能力，也提高了MMP-9的蛋白表达水平和活性，这对促进肿瘤细胞的侵袭有重要价值，这与本研究的结果相一致。MMP-9无论原发性增多还是继发性增多，均可以使肿瘤细胞的转移屏障破坏，肿瘤细胞易于侵袭周围组织和邻近脏器〔16,17〕，同时对肿瘤的脉管播散提供了重要的前提条件〔18〕。

综上，Aurora-A和MMP-9在浸润性肺腺癌中的表达升高是促进肿瘤形成和进展的重要因素。Aurora-A和MMP-9具有一定的正向协同作用，共同促进肿瘤的转移。

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R73

A

1005-9202(2017)24-6107-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.24.044

齐齐哈尔市科学技术计划项目(SF2D-2012067)

张永强(1978-)，男，副主任医师，主要从事胸外科常见病研究。

〔2016-07-15修回〕

(编辑 苑云杰)