半乳糖凝集素-3和盘状结构域受体1在食管鳞癌组织中的表达及意义

刘玉含 闫 琛 康运凯 魏 攀 (郑州人民医院检验科，河南 郑州 450003)

半乳糖凝集素-3和盘状结构域受体1在食管鳞癌组织中的表达及意义

刘玉含 闫 琛1康运凯 魏 攀2(郑州人民医院检验科，河南 郑州 450003)

目的探讨半乳糖凝集素(Galectin)-3和盘状结构域受体(DDR)1在食管鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测67例食管鳞癌组织中Galectin-3和DDR1蛋白表达，并分析二者与食管鳞癌临床病理特征的关系。结果正常食管组织中Galectin-3和DDR1蛋白表达率分别为13.43%(9/67)和16.42%(11/67)，食管鳞癌组织中Galectin-3和DDR1蛋白表达率分别为76.12%(51/67)和73.13%(49/67)，Galectin-3和DDR1在食管鳞癌组织中的表达均显著高于正常食管组织(P<0.05)，二者表达呈正相关(r=0.486，P=0.001)。Galectin-3和 DDR1蛋白表达均与食管鳞癌的TNM分期，分化程度，浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论食管鳞癌组织中Galectin-3和DDR1蛋白呈高表达，与食管鳞癌的发生、发展及生物学行为密切相关。

食管鳞癌；半乳糖凝集素-3；盘状细胞域受体1

半乳糖凝集素(Galectin)-3是一种肿瘤相关蛋白，可与层黏连蛋白发生结合，是一种重要的非整合素黏连蛋白受体，可能与多种恶性肿瘤的发生、发展及生物学行为相关〔1〕。盘状结构域受体(DDR)1是一种胶原受体，在多种上皮来源的恶性肿瘤组织中呈高表达〔2〕。本文探讨Galectin-3和DDR1蛋白在食管鳞癌组织中的表达及临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 2012～2013年郑州人民医院存档的手术切除食管鳞癌标本共67例，术前均未接受放疗、化疗，男40例，女27例；年龄<60岁18例，≥60岁49例。取距病变组织5 cm以上的正常食管组织67例作为正常对照组。所有标本均经10%中性甲醛溶液固定过夜，次日取材、脱水、石蜡包埋，连续切片，行HE染色及免疫组化染色。

1.2主要试剂 鼠抗人Galectin-3单克隆抗体购自福州迈新生物技术有限公司，兔抗人DDR1抗体和羊抗兔抗IgG抗体购自美国Santa Cruz公司，免疫组化SP试剂盒和二氨基联苯胺(DAB)显色剂购自北京中杉生物试剂有限公司。

1.3方法 采用免疫组化法对Galectin-3和DDR1进行染色，操作步骤按照试剂说明书进行。用0.01 mmol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)(pH7.4)替代一抗作为阴性对照。以美国Santa Cruz公司提供的阳性切片作为阳性对照。Galectin-3主要表达于细胞质中，以胞质内出现棕黄色或褐色颗粒判读为阳性细胞；DDR1主要表达于细胞膜上，以细胞膜上出现棕黄色或黄褐色颗粒判读为阳性细胞。

1.4评价标准 组织切片中阳性细胞占细胞总数的百分比可分为4级：阳性细胞<10%计0分，10%～25%计1分，26%～50%计2分，>50%计3分。组织切片中细胞染色强度分为3级：未着色计0分，淡黄色计1分，棕褐色计2分。2项指标的结果相乘得到0分为(-)，≥1分为(+)。染色结果及评分由两位经验丰富的病理科医生独立操作进行。

1.5统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行χ2检验，Spearman相关检验。

2 结 果

2.1Galectin-3和DDR1的表达 正常对照组和食管鳞癌组Galectin-3阳性率〔13.43%(9/67) vs 76.12%(51/67)〕及DDR1阳性率〔16.42%(11/67) vs 73.13%(49/67)〕差异显著(均P<0.05)。

2.2Galectin-3和DDR1的阳性表达与食管鳞癌患者临床病理特征的关系 见表1。Galectin-3、DDR蛋白阳性表达与食管鳞癌的TNM分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05)。

2.3食管鳞癌组织中Galectin-3和DDR1蛋白表达的相关性分析 食管鳞癌组织中Galectin-3和DDR1的表达呈正相关(r=0.471，P<0.05)。

表1 食管鳞癌组织中Galectin-3和DDR1阳性表达与不同临床病理特征的关系〔n(%)〕

3 讨 论

Galectin-3基因定位于人染色体14q21-22区域上，是半乳凝素家族中唯一的一个具有嵌合型结构并可抑制细胞凋亡的半乳凝素蛋白〔3〕，Galectin-3编码的蛋白质含有251个氨基酸残基，由3个结构域组成〔4〕。 Galectin-3的功能具有多样性，主要参与细胞的黏附、增殖及细胞外基质的构建，通过介导细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的黏附，促进肿瘤细胞的聚集及转移，同时也可通过与配体相结合发挥生物学作用，参与各种肿瘤发生和转移〔1〕。Galectin-3蛋白与肿瘤关系密切，在多种人类肿瘤中发现Galectin-3蛋白表达增高，如甲状腺微小乳头状癌〔5〕，肝癌〔6〕，乳腺癌〔7〕等，Galectin-3的高表达也可能与一些肿瘤的化疗耐药和不良预后密切相关〔7〕。本文提示Galectin-3可能在食管鳞癌发病机制中起一定的作用，可能与食管鳞癌的预后相关，其可能是肿瘤分期、分级及判断恶性表达的标志。DDR1基因定位于人染色体6p21区域，编码的蛋白质含913个氨基酸，由胞外区、跨膜区和胞内激酶区3个区域构成〔8〕，是近年来新发现的一种受体型蛋白酪氨酸激酶，能与胶原特异性结合并被其激活，进而参与一系列的细胞内外信号转导，促进机体细胞的黏附、迁移、分化和炎性因子的释放〔9〕。已有研究表明DDR1蛋白在胃癌〔10〕、胆管细胞癌〔11〕和结肠癌〔12〕等恶性肿瘤在呈高表达。本文提示DDR1高表达对判断食管鳞癌患者预后具有重要的参考价值，DDR1与食管鳞癌的侵袭转移能力密切相关，有望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的辅助指标。

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R735.1

A

1005-9202(2017)24-6120-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.24.050

河南省教育厅科学技术重点研究项目(No.14A320093)

1 郑州人民医院病理科 2 中国烟草总公司郑州烟草研究院

魏 攀(1983-)，男，博士，工程师，主要从事分子生物学和基因芯片研究。

刘玉含(1983-)，女，硕士，主管检验师，主要从事检验医学研究。

〔2016-09-24修回〕

(编辑 苑云杰/曹梦园)