一起野猪猪瘟感染的诊断

廖 飞，杨先富，包涛涛，王家鹏，汪忠荣，刘小惠，赵孝木

（1.黔东南州动物疫病预防控制中心，贵州凯里 556000；2.雷山县动物疫病预防控制中心，贵州雷山 522634；3.黔东南州动物卫生监督所，贵州凯里 556000）

猪瘟（classical swine fever，CSF）是由黄病毒科猪瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）引起猪的一种急性或慢性、高热性和高度接触性传染病，俗称“烂肠瘟”，不同品种的家猪、野猪都对其易感，一年四季均可发生，是威胁我国养猪业的主要传染病之一。其主要特征是：急性病例主要呈败血性变化，表现实质性器官出血、坏死或梗死等症状，慢性病例呈现纤维素性坏死性肠炎[1]。目前针对本病，临床上尚无特效药物治疗，即使临床治愈，也会呈现愈后不良，并且可能成为带病猪，从而感染同群健康猪。病猪和带毒猪是该病的主要传染源，其分泌物、排泄物、脏器及尸体、猪肉、血液，以及污染的废水、饲料、用具、饮水等都可能散播病毒。CSF的主要传播途径通过直接接触，经消化道感染[2]。隐性感染或患病母猪也可以通过胎盘垂直感染胎儿，导致产死胎或木乃伊胎、弱仔等。CSF在世界各地普遍存在，在我国流行尤为严重。专家学者认为，CSF是造成我国养猪业经济损失最大的单一病种，几乎所有的养猪场普遍存在CSFV，给我国养猪业带来巨大经济损失[3-5]。目前，我国野猪饲养量逐渐增多，但关于野猪CSF病例的报道较少。本研究针对一野猪养殖场出现的疑似CSF疫情进行了诊断，以期为家养野猪CSF病例的早期发现提供技术支持。

1 流行病学调查

通过现场调查及询问养殖场主方式，对该起野猪疫情进行了流行病学调查。该养殖场存栏野猪240头，其中种母猪30头、种公猪8头、育肥猪72头、仔猪130头，坚持实行自繁自养方式，饲喂自配料。该养殖场按免疫程序进行了春秋集中CSF活疫苗免疫，但对该时间段以外的新生仔猪以及怀孕母猪未接种CSF疫苗。2018年8月初，该野猪养殖场仔猪开始发病，至9月底，共有100头野猪发病（均为仔猪），死亡75头，死亡率为75%（75/100）。发病仔猪表现体温升高，并伴有食欲不振、先便秘后腹泻、呼吸困难、逐渐消瘦等症状，病程为1周至1个月不等。发病期间，该养殖场兽医曾用青霉素、恩若沙星、林可霉素等抗菌药治疗，但无效。

2 临床症状

发病野猪主要表现体温升高（41～41.5 ℃）、眼睛无神、精神萎靡、拱背、嗜睡（图1-A）、运动失调；眼结膜发炎，有泪痕；病初出现少食或废食，被毛粗糙；起立饮食时出现咳嗽，伴有呼吸困难；部分病猪先便秘后腹泻，逐渐消瘦（图1-B）。

图1 野猪CSF病例临床症状

3 病理变化

对病死仔猪进行剖检发现：内脏实质器官黏膜及浆膜均呈现不同程度的出血性病变，全身淋巴结出血、肿大，特别是腹股沟淋巴结和肠系膜淋巴结（图2-A、B），切面呈大理石样；脾脏出现边缘性梗死及不整齐，呈锯齿状（图2-C），肿大不明显；肺间质增宽，肾脏表面有出血点，大肠有典型性“扣状肿”（图2-D）。

图2 野猪CSF病例剖检病理变化

4 实验室诊断

4.1 细菌学诊断

将无菌采集的肝脏进行血涂片，革兰氏染色后，在显微镜下未观察到细菌。将无菌采取的血液以及肺、肝、脾及淋巴结等病料接种于培养基[4]，37 ℃培养20 h左右，均未观察到有细菌生长。

4.2 分子生物学检测

对采集的4份病死仔猪淋巴结组织样品，采用实时荧光定量RT-PCR方法[4，6]，进行猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）及CSFV检测。检测试剂盒购于北京世纪元亨动物防疫技术有限公司。检测结果显示：4份样品的PRRSV检测均未出现特异扩增曲线，判为PRRSV核酸阴性；4份样品的CSFV检测均出现特异扩增曲线，并且CT值小于临界值30（图3），判断为CSFV核酸阳性。结合临床症状、病理变化和实验室检测结以及流行病学调查结果（新增仔猪未免疫CSF疫苗），综合判断为CSFV感染。

5 讨论

该养殖场是野猪家养，病死猪主要是自繁的仔猪。该养殖场实行春秋集中免疫CSF疫苗，但还是出现了仔猪大面积发病，甚至死亡，主要原因是该养殖场未对新生仔猪及怀孕母猪及时补免，还有仔猪本来就对疫病抵抗力较差，在失去母源抗体保护后，更容易感染并暴发疫情[7]。本病只能采用预防为主的方针，制订适宜本场的免疫措施和程序，有条件的养殖场在免疫后要定期监测评估猪群免疫抗体，确保免疫抗体水平达到防控效果。条件好的猪场可以通过检测逐渐淘汰带毒猪、病猪，实施CSF净化[4，8]。此外，还需要加强饲养管理，做好栏圈清洁卫生，保持圈内通风，保持合理的饲养密度，减少各种应激，同时做好种猪引进的隔离与检测，严格落实各项生物安全制度，这样可有效防止CSF疫情的暴发。

图3 CSFV RT-PCR检测特异扩增曲线