血清DKK1、TK1、PG联合检测在胃癌诊断中的临床价值

唐 丹 曾 淑

胃癌为临床常见消化道恶性肿瘤，早期临床症状无特异性，常与胃炎或胃溃疡混淆，大部分胃癌患者在确诊时已处于中晚期，严重影响治疗效果及预后[1]。因此，有效筛查、及时发现胃癌有其必要性。近年来，血清学检查在癌症筛查中取得一定突破，其中分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)为Wnt信号通路中的调节因子，在细胞生长、凋亡及迁移运动中发挥重要作用，而参与恶性肿瘤生长发育[2]。细胞质胸苷激酶(TK1)为细胞周期依赖性标志物，与肿瘤的异常增殖密切相关，且在正常成人血清中含量少，近年来，被认为是一种应用前景良好的肿瘤标志物[3]。另外，胃蛋白酶原(PG)分为PGⅠ、PGⅡ，PGⅠ与胃泌酸腺细胞功能密切相关，PGⅡ则与胃底黏膜结构及功能稳定性相关，国内学者[4]提出，血清PGⅠ、PGⅡ在早期胃癌诊断中具有一定作用。基于此，本研究回顾性分析我院103例胃癌患者、90例胃良性疾病患者及82例同期健康体检者临床资料，探讨血清DKK1、TK1、PG及其联合检测在胃癌诊断中的应用效果，为胃癌诊疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2017年2月至2019年3月我院103例胃癌患者(胃癌组)及90例胃良性疾病患者(胃良性疾病组)临床资料。90例胃良性疾病患者中胃溃疡49例，胃炎41例。纳入标准：胃癌者经手术病理检查确诊，胃良性疾病者经胃镜及(或)病理检查确诊；年龄>18岁；病史、血清学检查等临床资料齐全。排除标准：既往恶性肿瘤史；放化疗史；合并其他恶性肿瘤。并纳入82例同期健康体检者为健康对照组。

1.2 方法

收集3组性别、年龄、体质量指数(BMI)等资料。受检者血清DKK1采用酶联免疫分析法检测(试剂盒由美国R&D公司提供)，参考范围0～3.3 ng/ml；血清TK1使用增强化学发光法检测(试剂盒由德国罗氏公司提供)，参考范围0～75.0 pmol/ml；血清PGⅠ及PGⅡ则使用乳胶增强免疫比浊法检测(试剂盒由北京九强生物技术股份有限公司提供)，参考范围分别为50.0～165.0 ng/ml、0～15.0 ng/ml。胃癌组及胃良性疾病组血清标本均为治疗前标本。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 3组一般资料比较

3组性别、年龄、BMI等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 3组一般资料比较

2.2 3组血清DKK1、TK1、PG比较

3组血清DKK1、TK1比较，均为胃癌组>胃良性疾病组>健康对照组(P<0.05)；血清PGⅠ比较，则为胃良性疾病组>健康对照组>胃癌组(P<0.05)；3组血清PGⅡ比较，差异无统计学意义(P>0.05)；见表2。

2.3 血清DKK1、TK1、PG及其联合检测对胃癌的诊断价值分析

经ROC曲线分析，发现血清DKK1、TK1、PGⅠ及其联合检测对胃癌均具有较高诊断价值(AUC=0.820、0.854、0.863、0.966，P<0.05)，血清DKK1、TK1、PGⅠ诊断的cut-off值分别为3.890 ng/ml、90.755 pmol/ml、48.745 ng/ml，且联合检测诊断价值最高，其灵敏度可达94.17%，特异度可达90.70%，见表3、图1。

表2 3组血清DKK1、TK1、PGⅠ、PGⅡ比较

表3 血清DKK1、TK1、PGⅠ及其联合检测对胃癌的诊断价值分析

图1 血清DKK1、TK1、PGⅠ及其联合检测诊断胃癌的ROC曲线

2.4 血清DKK1、TK1、PGⅠ水平与胃癌患者临床病理特征的关系

不同性别、年龄胃癌患者血清DKK1、TK1、PGⅠ水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)；肿瘤直径大、临床分期高及伴血管浸润、淋巴结转移者血清DKK1、TK1水平更高(P<0.05)，血清PGⅠ水平更低(P<0.05)；见表4。

3 讨论

近年来，开展血清学肿瘤标志物筛查、尽早发现早期癌症工作，受到学术界及临床的广泛关注[5]。DKK1为一种新型肿瘤标志物，现已证实是肺癌及食管癌的治疗新靶点。DKK1能通过抑制Wnt经典通路，诱导细胞凋亡，也能在细胞增殖、细胞迁移活动中发挥双向调节作用，而在胃癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤发生发展中占据重要地位[6]。TK1为国际公认的细胞异常增殖标志物，而胃癌源于胃黏膜上皮，属异常增殖类疾病，故TK1在胃癌诊断中具有一定应用价值[7]。PGⅠ、PGⅡ可反映胃黏膜腺体、细胞数量及胃黏膜萎缩程度，胃底腺萎缩时，主细胞数量减少，使PGⅠ分泌减少，引起血清PGⅠ含量降低；而在萎缩性胃炎出现肠上皮化生等情况时，PGⅡ水平也可显著升高[8]。近年来，有学者提出，血清PG的变化可作为胃癌前兆的亚临床指标，在胃癌筛查中发挥重要作用[9]。对此，本研究就血清DKK1、TK1、PG及其联合检测在胃癌诊断中的应用价值展开分析，以上述项目作为胃癌筛查新指标的可行性，取得一定成果。

本研究结果显示，3组血清DKK1比较，均为胃癌组>胃良性疾病组>健康对照组，且血清DKK1对胃癌具有较高诊断价值。分析其原因可能为：胃癌患者体内可出现β-catenin改变，而引起Wnt/β-catenin信号通路被抑制，引起DKK1高表达，并生成负反馈回路，使DKK1在胃癌组织中表达升高；而DKK1也是一种分泌型蛋白，可分泌至血液中，随着胃癌组织表达增多，血清DKK1水平也显著升高[10]。3组血清TK1均为胃癌组>胃良性疾病组>健康对照组，且血清TK1对胃癌具有较高诊断价值。究其原因可能为：TK1在细胞周期的G1期和S期交界处开始升高，并在G2期最高，故TK1在S/G2期高表达；而肿瘤细胞增殖快，S/G2期细胞比例高，使TK1表达水平高[11]。另外，血清PGⅠ比较，则为胃良性疾病组>健康对照组>胃癌组，而血清PGⅠ对胃癌也具有较高诊断价值。推测该结果由以下2个因素作用引起：PGⅠ与胃泌酸腺细胞功能关系密切，部分胃良性疾病可引起胃酸分泌增多，引起血清PGⅠ升高[12]；而出现胃癌时，黏膜细胞萎缩，使分泌PGⅠ的功能降低，且致癌因子还能导致胃蛋白酶基因受损突变，进一步造成PGⅠ表达减少[13]然而，3组血清PGⅡ比较，差异无统计学意义。这也说明，血清PGⅡ变化情况不明显，对胃癌的诊断价值较低。不仅如此，血清DKK1、TK1、PGⅠ联合检测对胃癌的诊断价值高于单项指标检测，且AUC值可高达0.966。提示，临床可将血清DKK1、TK1、PGⅠ同时纳入胃癌筛查项目，以保证筛查准确性，为胃癌的尽早诊疗创造条件。

表4 血清DKK1、TK1、PGⅠ水平与胃癌患者临床病理特征的关系

除上述结论外，本研究还发现，肿瘤直径大、临床分期高及伴血管浸润、淋巴结转移者血清DKK1水平更高。提示，胃癌恶性程度越高者，血清DKK1水平也越高，与外国学者Dovjak等[14]研究结果一致。考虑该结果与胃癌中Wnt/β-catenin信号负反馈回路使DKK1表达升高，也增强细胞增殖作用，使DKK1水平随恶性程度升高而增加有关[15]。且肿瘤直径大、临床分期高及伴血管浸润、淋巴结转移者血清TK1水平也更高。这也可能与胃癌恶性程度越高时，肿瘤细胞增殖能力越强，使S/G2期细胞比例急剧升高，引起TK1表达升高有关[16]。此外，肿瘤直径大、临床分期高及伴血管浸润、淋巴结转移者血清PGⅠ水平更低。究其原因与恶性程度越高的胃癌，黏膜细胞萎缩、黏膜主细胞丧失更严重，造成PGⅠ分泌急剧减少，而使血清PGⅠ含量降低有关[17-18]。

综上所述，血清DKK1、TK1、PGⅠ均能辅助诊断胃癌，但联合检测诊断价值最高，且血清DKK1、TK1、PGⅠ水平与胃癌临床病理特征密切相关，临床应用价值高。