DAPK3和CDK8在宫颈癌组织中的表达及临床意义

孙瑞瑞 吴晗 齐艳姝 黄如意 傅鉴乾

[摘要]目的探讨死亡相关蛋白激酶3（DAPK3）和细胞周期蛋白依赖性激酶8（CDK8）在宫颈癌组织中的表达及临床意义。方法选取廈门市第五医院2018年1月至2021年1月进行宫颈癌手术治疗的患者86例，取手术过程中的宫颈癌组织与癌旁正常组织进行研究，探讨宫颈癌组织与癌旁正常组织中DAPK3与CDK8 表达情况、宫颈癌组织中DAPK3与CDK8表达与临床特征的关系及DAPK3与CDK8表达在宫颈癌组织中的相关性。结果宫颈癌组织DAPK3低表达率（75.58%）明显高于癌旁正常组织（16.28%），CDK8高表达率（86.05%）明显高于癌旁正常组织（9.30%），差异有统计学意义（P<0.05）;DAPK3与CDK8在宫颈癌组织中的表达同年龄、病理类型、FIGO分期、分化程度无明显相关性，差异无统计学意义（P>0.05）;DAPK3与CDK8表达在宫颈癌组织中呈负相关，相关性中度（r=-0.552，P=0.000）。结论在宫颈癌组织中DAPK3表现为低表达，CDK8表现为高表达，两者呈中度负相关，两者与患者年龄、病理类型等临床特征不存在相关性，可为临床提供参考。

[关键词]死亡相关蛋白激酶3;细胞周期蛋白依赖性激酶8;宫颈癌;免疫组织化学;阳性细胞

[中图分类号]R737.33    [文献标识码]A    [文章编号]2095-0616（2022）02-0163-04

Expression and clinical significance of DAPK3 and CDK8 in cervical carcinoma tissues

SUN Ruirui    WU Han    QI Yanshu    HUANG Ruyi    FU Jianqian

Department of Medical Oncology，the Fifth Hospital of Xiamen，Fujian，Xiamen 361101，China

[Abstract]Objective To investigate the expression and clinical significance of death-associated protein kinase 3 （DAPK3）and cyclin-dependent kinase 8 （CDK8）in cervical carcinoma tissues. Methods A total of 86 patients who received surgical treatment of cervical carcinoma in the Fifth Hospital of Xiamen from January 2018 to January 2021 were selected for a study of their cervical carcinoma tissues and the normal tissues adjacent to the carcinoma during the operation. The expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues and the normal tissues adjacent to the carcinoma，the relationship between the expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues and clinical features，and the correlation between the expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues were investigated. Results The low expression rate of DAPK3 in the cervical carcinoma tissues （75.58%）was significantly higher than that in the normal tissues adjacent to the carcinoma （16.28%），and the high expression rate of CDK8 （86.05%）was significantly higher than that in the normal tissues adjacent to the carcinoma （9.30%），with statistically significant differences （P<0.05）. The expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues had no significant correlation with the age，pathological type，FIGO staging and degree of differentiation，and the differences were statistically insignificant （P>0.05）. The expression of DAPK3 in the cervical carcinoma tissues was negatively correlated with that of CDK8，and the correlation was moderate （r=-0.552，P=0.000）. Conclusion In cervical carcinoma tissues，the expression of DAPK3 is low expression，while the expression of CDK8 is high expression. The two are moderately negatively correlated. There is no correlation between them and the clinical characteristics of the patients such as age and pathological types，etc. These can be reference for clinical practice.

[Key words]Death-associated protein kinase 3;Cyclin-dependent kinase 8;Cervical carcinoma;Immunohistochemistry;Positive cell

宫颈癌临床发病率高，侵袭性强，预后差，其病死率在妇科恶性肿瘤中仅次于乳腺癌[1]。宫颈癌的致病因素复杂，一般认为是由于人乳头状病病毒（human papillomavirus，HPV）的持续感染及癌基因与抑癌基因表达异常引起的[2]。死亡相关蛋白激酶3（death-associated protein kinases 3，DAPK3）与细胞周期蛋白依赖性激酶8（cyclin-dependent kinase 8，CDK8）分别属于机体细胞抑癌基因与癌基因表达的产物，DAPK3高度表达可抑制细胞集落形成，从而促进细胞凋亡叫CDK8作为人体周期素依赖性激酶家族的一员，则通过与中介体结合，从而发挥促癌功能[4]。临床发现DAPK3与CDK8在宫颈癌组织中存在着基因表达失调，两者与宫颈癌的发生与发展密切相关。但目前宫颈癌组织DAPK3和CDK8表达情况的共同研究较少，且相关研究中未提及DAPK3和CDK8两者表达情况的相关性。本已经为进一步探讨DAPK3和CDK8 在宮颈癌组织中的表达及临床意义，现报道如下。

1    资料与方法

1.1    一般资料

选取厦门市第五医院2018年1月至2021年1月进行宫颈癌手术治疗的患者86例，取手术过程中的宫颈癌组织与癌旁正常组织进行研究。纳入标准：①均经病理检查初次确诊为宫颈鳞癌或宫颈腺癌;②根据国际妇产科联盟（International Federation of Gynecology and Obstetrics，FIGO）宫颈癌分期（2018年）[5-6]为I～II期。排除标准：①手术之前进行过化疗、免疫药物治疗等治疗的患者;②其他恶性肿瘤或恶性肿瘤病史者;③脑梗死、心肌梗死等重大疾病或重大疾病病史。本研究用组织均为病理诊断后剩余的新鲜无坏死组织，组织的获取取得患者或其家属的知情同意，研究获得医院医学伦理委员会批准。86例患者年龄23～83岁，平均（52.45±15.77）岁;病理类型：腺癌34例;鳞癌52例;FIGO分期：I A 13 例，I B 35例，II A 20例，II B 18例;分化程度：高分化32例，中分化23例，低分化31例。

1.2    方法及评价标准

所有组织标本新鲜取材后，经10%甲醛水溶液固定至少24 h，采用全自动组织脱水机（Leica Biosystems Nussloch GmbH，型号：Leica ASP300S）脱水，组织包埋机（Leica Biosystems Nussloch GmbH，型号：Leica HistoCore Arcadia）进行石蜡包埋，平推式切片机（Leica Biosystems Nussloch GmbH，型号：Leica SM2010 R）进行切片。采用免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）法检测DAPK3 和CDK8表达情况[7]，DAPK3免疫组化试剂盒购自上海圻明生物科技有限公司，CDK8免疫组化试剂盒购自上海雅吉生物科技有限公司。在400倍光学显微镜（美国SWIFT三目光学生物显微镜，型号：SW380T ）下观察宫颈癌组织与癌旁正常组织切片，任意选取6个视野，每个视野观察100个细胞。其中，CDK3为核染色蛋白，细胞核出现着色视为阳性细胞;DAPK3表达于胞浆，细胞质出现着色视为阳性细胞。阳性细胞百分数评分标准叫阳性细胞数≤5%为0分;>5%、≤20%为1分;>20%、≤50% 为2 分;>50%、≤75% 为3 分;>75% 为4分。着色程度强弱评分标准[9]：无着色为0分;轻度为1分;中度为2分;重度为3分。表达强度=着色程度强弱评分×阳性细胞百分数评分。总评分≤5分为低表达，>6分为高表达。

1.3统计学方法

2    结果

2.1    宫颈癌组织与癌旁正常组织中DAPK3与CDK8表达情况比较

宫颈癌组织DAPK3低表达率（75.58%）明显高于癌旁正常组织（16.28%），CDK8高表达率（86.05%）明显高于癌旁正常组织（9.30%），差异有统计学意义（P <0.05），见表1。

2.2    宫颈癌组织中DAPK3与CDK8表达与临床特征的关系

DAPK3与CDK8在宫颈癌组织中的表达与年龄、病理类型、FIGO分期、分化程度无明显相关性（P >0.05），差异无统计学意义，见表2。

2.3    DAPK3与CDK8表达在宫颈癌组织中的相关性分析

DAPK3与CDK8表达在宫颈癌组织中呈负相关，相关性中度（r=-0.552，P=0.000），见表3。

3    讨论

宫颈癌的发生与发展同机体癌基因和抑癌基因的表达息息相关，了解和掌握细胞癌基因和抑癌基因的表达有利于肿瘤疾病的诊断和治疗[10]。DAPK3作为DAPK家族中的一员，其基因属于1号常染色体的抑癌基因，在许多肿瘤组织中表达失调[11]。临床表明DAPK3是一种多域结构蛋白，与细胞增殖、死亡等信号传导途径相关联，其过度表达具有抑制细胞集落形成、促进细胞凋亡的生物学能力[12]。而与DAPK3相反，CDK8作为CDK家族的一员，是原癌基因的产物，其参与细胞周期调控、细胞分裂等过程，其过度表达可以加快癌细胞的生长和分裂进程[13]。可见，在临床宫颈癌疾病的诊断和治疗过程中，对DAPK3与CDK8表达情况的了解和探讨具有重要意义。

本研究中，宫颈癌组织DAPK3低表达率明显高于癌旁正常组织（P<0.05），CDK8高表达率明显高于癌旁正常组织（P<0.05），提示DAPK3与CDK8在宫颈癌组织中表达失调，两者与宫颈癌的发生有着密切关系;宫颈癌组织中DAPK3出现低表达和CDK8出现高表达的可能性更大，而癌旁正常组织中DAPK3出现高表达和CDK8出现低表达的可能性更大，预示着DAPK3低表达情况与CDK8 高表达情况可以预测宫颈癌的发生与发展，在临床宫颈癌诊断与治疗中具有一定的参考价值[14]。DAPK3与CDK8在宫颈癌组织中的表达同年龄、病理类型、FIGO分期、分化程度均无明显相关性（P>0.05），提示DAPK3与CDK8表达失调与患者年龄、病理类型、FIGO分期、分化程度等临床特征均无明显线性相关，意味着DAPK3与CDK8的表达不受患者病理类型、分化程度等临床特征的影响;同时也表明DAPK3与CDK8的表达主要与宫颈癌的发生密切相关[15]。DAPK3与CDK8表达在宫颈癌组织中呈负相关，相关性中度（r=-0.552，P=0.000），提示在宫颈癌组织中DAPK3与CDK8表达是存在相关性的，并且是呈中度的负相关，将出现此消彼长现象。同时结果中显示，86例宫颈癌组织中有65例出现DAPK3低表达和CDK8高表达，提示DAPK3低表达患者往往也具有CDK8高表达情况，预示患者抑癌基因与癌基因表达会同时出现失调现象;而宫颈癌组织中DAPK3出现低表达，同时CDK8出现高表达，将有利于癌细胞的增殖和生长[16]。由此可知，DAPK3与CDK8的表达情况对于预示宫颈癌的发生与发展具有非常重要的意义，能够为宫颈癌疾病的发生提供早期依据，对于宫颈癌癌细胞的增殖情况也具有提示作用。但因为本研究临床数据较少，且入选患者均为宫颈癌早期手术患者，故存在一定的局限性，仅能为临床提供一定参考。在今后的临床相关研究中，可能需要增加样本量，扩大FIGO分期范围，来进行进一步的研究和探讨。

综上所述，在宫颈癌组织中DAPK3表现为低表达，CDK8表现为高表达，两者表达情况呈中度负相关，两者表达情况与患者年龄、病理类型、FIGO分期、分化程度均不存在相关性，可为临床提供参考。

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