泰万菌素对PRRSV 感染的临床调节作用及对猪瘟和口蹄疫疫苗免疫效果的影响

万 进，戴银娣，马妮妮，孙少辉，朱光山，徐瑞华，马小平，张志榜，王聪

（1.中牧实业股份有限公司，北京 100070；2.中牧南京动物药业有限公司，江苏南京 210012；3.宜春学院生命科学与资源环境学院，江西宜春 336000）

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的以繁殖母猪流产，产死胎、弱仔、木乃伊胎等繁殖障碍及仔猪和育肥猪呼吸道症状为特征的病毒性传染病，严重影响全球养猪业的健康发展[1]。多项研究证明，PRRSV感染可导致猪只免疫抑制。Thanawongnuwech 等[2]研究发现，猪肺血管内巨噬细胞是PRRSV 的重要复制位点，PRRSV 可对肺泡巨噬细胞产生不利影响，并导致肺血管内巨噬细胞杀菌功能弱化，促进猪血源性细菌感染。Labarque 等[3]研究发现，使用PRRSV 减毒活疫苗免疫猪只产生的特异性抗体无法清除肺部病毒，其机制与PRRSV 感染巨噬细胞系统引起机体细胞免疫功能低下，从而影响猪体的正常免疫功能有关。Li 等[4]研究发现，PRRSV感染猪群对猪瘟（CSF）疫苗的免疫应答水平明显低于未感染猪群，尤其在CSF 疫苗免疫接种3～5周后该差异更加明显，推测PRRS 高发猪场的CSF高流行率可能与感染PRRSV 的猪只对CSF 疫苗的低水平免疫应答有关。王美君等[5]对PRRSV 持续性感染猪场进行CSF 疫苗免疫抗体水平监测时发现，猪瘟病毒（CSFV）抗体水平与猪群PRRS 发病程度密切相关。此外，还有多项研究[6-9]证明，CSF 的免疫失败与猪场PRRSV 感染有关。

泰万菌素是大环内酯类专用动物抗生素，具有抗菌活性和抑制炎症反应等作用[10-11]，对支原体、螺旋体以及大部分革兰阳性菌和部分革兰阴性菌均有较强的抗性，主要用于防治家禽支原体病、猪喘气病、猪痢疾、猪增生性肠炎等疫病[12-13]。据报道[14-15]，泰万菌素还能减少猪群PRRSV 的感染。本研究以PRRSV 阳性场的母猪和种公猪为试验对象，验证泰万菌素在田间条件下是否对PRRSV感染水平具有调节功能，分析其对CSF、口蹄疫（FMD）疫苗免疫效果产生何种影响，以期为猪场制定PRRS 及其他疫病的免疫方案提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物

河南省某规模猪场，共有基础母猪2 000 头、种公猪120 头，商品猪若干。母猪群有减料现象，部分母猪妊娠中期发生流产，全群流产率约为8%。病原微生物监测发现，本场非洲猪瘟病毒（ASFV）抗原、抗体及伪狂犬病毒（PRV）gE 抗体均为阴性。有3 头母猪流产，共产死胎15 个，产房脐带血呈PRRSV 抗原阳性。母猪群免疫方案：CSF 疫苗（传代细胞苗）、PRRS 疫苗（R98株）均1 年3 次普免。

1.2 药物

药物A（25%酒石酸泰万菌素可溶性粉），由中牧南京动物药业有限公司提供；药物B（25%酒石酸泰万菌素可溶性粉），购自某动保公司。

1.3 主要试剂

PRRSV X3 抗体检测试剂盒、Real PCR NA PRRS 1-2型RNA 检测预混液试剂盒、CSFV 抗体检测试剂盒、口蹄疫病毒（FMDV）抗体检测试剂盒、Real PCR ASFV DNA 检测预混液试剂盒，均购自美国爱德士（IDEXX）生物科技公司。

1.4 试验方案

2 000 头基础母猪随机等分为A、B 两组，给药前采集A 组和B 组母猪血液用于PRRSV、CSFV、FMDV 抗原和抗体检测。A 组给药方案：每吨水添加750 g 药物A，全群饮水用药，每月用药14 d，连用3 个月；B 组给药方案：每吨水添加750 g 药物B，用药方式及疗程同A 组。3 个月后采血，分离血清用于PRRSV、CSFV、FMDV 抗原及抗体检测。详细记录A 组用药前后母猪的各项生产性能指标，包括母猪流产率、年化淘汰率平均值、后备母猪利用率、母猪日采食量（全程采食统计）、窝产仔数、断奶仔猪成活率、仔猪平均出生重、断奶重，用于后续药物疗效评估。

选择种公猪120 头，每天灌服药物A 5 g/头，每月连用14 d，连用3 个月。用药前和用药结束后，分别采血检测PRRSV 抗体水平。

1.5 数据统计分析

PRRSV 抗体阳/阴性判断标准：计算每个样品的S/P值，如果S/P值小于0.4，则判定为阴性；如果S/P值大于或等于0.4，则判定为阳性。

CSFV 抗体阳/阴性判断标准：计算每个样品的阻断率（PI），如果被检样本的PI 值大于或等于40%，则判定为阳性；如果PI 值小于或等于30%，则判定为阴性；如果PI 为30～40%，则需重测。

FMDV A/O型抗体阳/阴性判断标准：计算每个样品的PI，如果PI 值大于或等于50%，则判定为阳性；如果PI 值小于50%，则判定为阴性。

使用GraphPad Prism 8.00 软件对试验数据进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 母猪群用药前后PRRSV 抗体检测

结果（表1）显示：母猪群用药前后的PRRSV 抗体阳性率均为100%。用药后的PRRSV抗体水平、S/P值离散度相比用药前均差异显著（P＜0.05），表明泰万菌素具有调节PRRSV 感染程度，优化猪群PRRSV 抗体水平的作用。此外，结合猪群S/P值在各区间的比例数据能更好地反映猪群中PRRSV 的活动状态，S/P值在0.4～2.0范围内视为免疫效果最佳，该值变高（≥2.0），表明PRRSV 有活跃迹象，将对母猪生产性能造成一定影响。由表1 可知，A 组用药前后PRRSV 抗体S/P值在0.4～2.0 范围内所占比例由53.6%升至89.3%，B 组由50.0%升至83.3%。表明用药泰万菌素后，猪群的免疫效果整体得到提升。

2.2 母猪群用药前后CSFV 抗体检测

结果（表1）显示：A、B 两组猪群用药后，CSFV 抗体阳性率分别由67.9%、75.0%提高到100%，抗体PI 值离散度分别由34.3%和11.6%降至7.9%和4.6%，表明用药后CSFV 抗体水平更整齐。此外，CSFV 的平均抗体水平也有大幅度提升，A 组由50.8%升至91.1%，B 组由49.5%升至81.1%，说明两组母猪群对CSF 疫苗的免疫应答机能已得到很好恢复。

表1 给药前后母猪群PRRSV、CSFV 平均抗体水平、阳性率及离散度变化

2.3 母猪群用药前后FMDV A/O型抗体检测

与未给药对照组相比，试验组猪群FMDV A/O型抗体阳性率均有小幅提高，抗体PI 值略微增长，且PI 值离散度略微降低（表2），说明泰万菌素对猪群FMDV A/O型抗原免疫应答水平有一定调节作用。

表2 母猪群使用泰万菌素前后FMDV A/O型抗体阳性率、离散度变化 %

2.4 给药前后母猪生产性能指标比较

对比用药前后母猪生产性能指标（表3），经泰万菌素治疗母猪的各项生产性能得到改善，如流产率下降8.0%，母猪年化淘汰率平均值下降4.0%，窝产仔数增加1.3 头，仔猪断奶重增加0.6 kg，断奶仔猪成活率增长5.1%，说明泰万菌素能在一定程度上提升母猪群的生产成绩。

表3 用药前后母猪各项生产性能指标比较

2.5 种公猪用药前后PRRSV 抗体检测

结果（表4）显示：经泰万菌素保健3 个月后，种公猪PRRSV 抗体阳性率由100%降至66.1%，抗体S/P值均降至2.0 以内，且离散度降至22.5%。该场种公猪未免疫PRRSV，用药前抗体阳性率为100%，说明种公猪全群自然感染过PRRSV。用药后的结果提示泰万菌素可能通过抑制PRRSV 在猪体内的复制，使猪群的感染水平降低，从而使猪群PRRS 感染程度逐渐趋于稳定，PRRSV 抗体水平有所下降。

表4 给药前后种公猪群PRRSV 平均抗体水平、阳性率及离散度变化

3 讨论

3.1 猪群PRRSV 抗体S/P 值的含义需系统解读

本试验中A、B 组用药泰万菌素前后S/P值≥2.0 样本数大幅降低，PRRSV 平均抗体水平及离散度更趋优化，且对比用药前后母猪繁殖性能、窝产仔数、仔猪断奶重、断奶仔猪成活率等生产指标发现，经泰万菌素治疗后的母猪群生产成绩得到提升，与Stuart 等[16]、Takagi 等[17]、李桃梅[18]关于泰万菌素对PRRSV 的作用结果一致，表明泰万菌素具有调节PRRSV 感染程度的作用。该试验通过对PRRSV 抗体S/P均值进行分析，对猪场PRRSV感染程度有了初步了解，但对S/P值的全面认识还需考虑到以下几种情况：对于阴性猪群，因为未免疫，只要通过ELISA 或IFA 检测到特异性抗体便可以确诊。美国爱荷华州立大学兽医诊断实验室认为，将PRRSV 阴性猪群的S/P=0.4 设为标准cutoff 值并不合适，应该将其下调至0.2 或0.1，以便能更早发现PRRSV 感染，及早处理（行业会议PRRS 防控经验交流）。对于阳性猪群，仅凭S/P值大小无法准确评估PRRSV 感染状态，有从业者将S/P值大于2.0 归为野毒感染，S/P值小于2.0 判定为疫苗免疫，但笔者认为这是值得商榷的。由于猪只的个体差异，毒株的差异及接触病毒时间的长短不同，都可能导致S/P值不同，比如处于强毒感染早期的S/P值有低于2.0 的情况，这时经验性的2.0基线将导致误判。也有从业者提出在固定疫苗、免疫程序和生产管理模式以及监测方法的前提下，可以通过定期抽查一定比例猪群的抗体水平，绘制本猪群的基准线，当抗体S/P值发生异动时，则预警感染和疫病的发生，这是一个宏观的猪群疫病预警机制。此外，对单一动物间隔一段时间进行两次抗体检测的双血清法，可从抗体S/P值的波动，更准确地推测感染状况。

3.2 CSFV 抗体水平的提升与泰万菌素使用紧密相关

A、B 两组用药后CSFV 抗体水平及阳性率大幅提升，这与Li 等[4]、张建新等[9]的报道类似。其机制可能是泰万菌素通过抑制PRRSV 在猪体内的复制，导致猪体内PRRSV 载量下降，从而在一定程度上缓解由PRRSV 感染导致的免疫抑制状态，故CSF 疫苗的免疫效果得以提升。Zhao 等[10]也发现泰万菌素可以通过抑制NF-κB 途径的活化来发挥抗炎等免疫调节作用，从而减轻PRRSV 感染仔猪的肺部病变评分，改善仔猪生长性能。此外CSF等疫苗免疫应答水平不高还可能与某些病毒的抗体依赖性增强作用（ADE）有关，如PRRSV 抗体引起的ADE 现象[19]。在免疫PRRS 弱毒疫苗后，猪只产生抗体的同时PRRSV 复制也加剧，一定程度上抑制了猪只的机体免疫功能并对PRRSV 清除产生负面作用，使得猪免疫系统对其他疫苗的免疫应答水平随之下降。

3.3 猪群疫苗免疫效果不佳需考虑免疫抑制因素

PRRSV 等病毒主要感染猪肺泡内巨噬细胞从而导致机体的免疫抑制，该种现象不但使猪肺部组织PRRSV 抗体水平不足，无法中和体内病毒[5]，也使机体对CSFV[7]、FMDV[20]等的免疫应答水平不高，本试验结果亦是如此。因此在评价猪场疫苗免疫效果时，除了考虑疫苗质量高低及免疫程序是否合理这两个因素之外，还需考虑猪场免疫抑制疾病的防控是否已得到很好解决。

综上，泰万菌素能较好地调节猪群PRRSV 平均抗体水平，使S/P值更加优化，猪群回归正常生产性能水平。泰万菌素通过对PRRSV 感染程度的调节，可以间接影响猪群的免疫状态，使CSF、FMD 疫苗的免疫效果有所提升，尤其对CSFV 平均抗体水平、离散度及阳性率有明显改善。