US-CNB免疫组化检测用于乳腺癌淋巴结转移诊断中的临床价值

王树人,刘水（江苏省盐城市第一人民医院,江苏 盐城 224000）

乳腺癌是多发于女性机体恶性肿瘤，发病率逐年升高。临床统计显示，在全身恶性肿瘤疾病中，乳腺癌占比为7%-10%，其发病率仅次于子宫癌[1]。有研究[2]发现，乳腺癌与遗传密切相关。该疾病在发病期间，癌细胞极易向其他器官、组织转移，可对正常器官与组织造成损伤，其中淋巴结是该疾病常见转移部位，主要通过胸大肌外侧、逆行等途径损伤淋巴结，严重危及患者生命安全[3]。因此，对早期乳腺癌患者进行诊断鉴别，可在确定病变部位的同时观察淋巴结转移情况，据此对症治疗。超声是利用声波获取声能的一种技术，通过超声波探查病灶，能够鉴别不同疾病类型。超声引导下细针穿刺细胞学检测（USFNAC）是一种微创诊断方法，由超声辅助穿刺，可快速确定穿刺部位。报道显示，US-FNAC可对淋巴结快速扫描，观察是否出现病灶。超声引导下粗针穿刺活检（UG-CNB）可通过粗针穿刺获取较多组织量，诊断准确度相对较高。同时，粗针穿刺后可将获取的组织使用免疫组化进行检测。以上两种诊断方法虽均有较高的诊断价值，但是诊断准确度依然存在差异。为此，本文以我院86例乳腺癌淋巴结转移患者为例，探究US-CNB免疫组化检测的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院86例乳腺癌淋巴结转移患者（2020年2月-2023年8月）深入分析，依据随机数字表法分成两组，每组43例，对照组年龄48-65岁，平均（56.55±3.36）岁；病程1-4年，平均（3.51±0.23）年。观察组年龄49-64岁，平均（56.13±3.27）岁；病程1-3年，平均（3.12±0.51）年。两组患者基础资料无统计学差异（P＞0.05）。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 纳入、排除标准 纳入标准：①符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范》[4]中相关诊断标准；②均出现乳房疼痛、肿块、乳头糜烂、乳头溢液等临床症状；③病历资料完整；④均签署知情同意书。排除标准：①凝血功能障碍者；②心、肝、肾严重功能异常者；③合并严重基础性疾病者；④合并其他恶性肿瘤者；⑤伴有免疫性疾病者；⑥研究前30天内服用过其他糖皮质激素药物者；⑦机体严重感染者；⑧研究期间退出者。

1.3 方法 对照组采用US-FNAC细胞学检测：所用仪器为LEICA BOND-MAX超声诊断仪，协助患者平躺于诊断台，头部放平，上肢放松后放于躯体两侧，下肢伸直，确定可疑淋巴结位置后选择穿刺部位，使用2%盐酸利多卡因（厂家：北京益民药业有限公司，国药准字H11020322，规格：2ml:40mg）进行表面麻醉，并进行消毒；使用超声辅助穿刺，对所选淋巴区进行探查，并使用穿刺针（7号穿刺针）对该区进行穿刺并取穿刺物，同时放入载玻片中，祛湿后进行HE染色与镜检。阳性判定标准：检出癌细胞。

观察组采用US-CNB免疫组化检测：①US-CNB活检：所用仪器及体位摆放同US-FNAC，使用超声探查穿刺部位并将其暴露，清洁需穿刺部位的皮肤，并局部麻醉，于穿刺部位做切口，以此降低穿刺难度。穿刺针方向与探头长轴方向保持一致，以便活检针击发后的取样检测。阳性判定标准：出现恶性淋巴结。②免疫组化检测：石蜡包埋：确定并固定组织标本，石蜡包埋；脱蜡：选取载玻片后将其完全放入甲苯溶液10min。水化：将载玻片放入乙醇溶液中，选择三种浓度（100%、95%、75%）乙醇溶液，每种溶液中各放一个载玻片，浸泡5min，再使用PBS溶液清洗。抗原修复：将载玻片放入修复液中，保持修复液恒温，温度与沸水温度相同，再将载玻片取出，待温度降至室温后进行清洗。灭活：将载玻片放入双氧水中，再将其放入25℃环境中，10min后将其取出，清洗。一抗孵育：将一抗滴入载玻片并孵育，其孵育温度为40℃，孵育时间控制在24h。增强：选取聚合物增强剂后将其放入载玻片中孵育20min。二抗孵育：对载玻片进行冲洗，室温孵育30min。显色：将显色液滴入载玻片中，使用显微镜进行观察。封片：梯度乙醇脱水后，用中性树胶封片。

1.4 观察指标 分析两组超声引导下细针穿刺细胞学检测（USFNAC）、超声引导下粗针穿刺活检（UG-CNB）结果；分析USFNAC与UG-CNB诊断灵敏度、特异度、准确度。

1.5 统计学方法 使用SPSS25.0软件进行统计分析，计量资料（±s）用t检验，计数资料（n，%）用χ2检验，当P＜0.05时表示数据对比差异有统计学意义。

2 结果

2.1 US-FNAC、US-CNB检测结果 US-FNAC细胞学检测可对淋巴结相关区域进行检测，显示该区域中细胞核染色情况，快速确定癌细胞；US-CNB病理组织学检测能发现细胞核深度染色的癌细胞。

2.2 对比两组诊断效能 两组诊断效能对比，有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组诊断效能比较

3 讨论

研究[5]显示，乳腺癌是女性常发疾病，与不良饮食、环境污染、不良生活习惯等密切相关。该疾病早期临床表现为乳头溢液、腋窝淋巴结肿大、乳房肿块等，随着疾病进展，癌细胞极易出现转移，引起其他器官、组织病变[6]。腋窝淋巴结是该疾病常见转移部位，及时、准确地诊断腋窝淋巴结状态，可快速发现是否出现淋巴结转移[7]。研究[8]指出，对乳腺癌患者有效诊断，可及时发现是否出现淋巴结转移，从而采取正确的治疗方案，有助于降低病死率，延长生存时间。前哨淋巴结活检术是诊断该疾病的金标准，具有较高灵敏度、准确度，可对疑似组织进行取样并进行病理学检查[9]，但是，诊断期间易对机体造成损伤，且术后可出现多种并发症，如淋巴结水肿、切口感染等，临床应用受限。

超声在诊断乳腺癌疾病中的应用较为广泛，能够准确判断是否出现淋巴结转移，诊断操作流程简单，对机体无损伤，可进行多次重复诊断，且诊断成本低[10-11]。在正常机体中，腋窝淋巴结主要以椭圆形、长椭圆形为主，若受癌细胞侵袭后，极易损伤淋巴结被膜，导致形变（类圆形、圆形）[12]。因此，对乳腺癌患者淋巴结采用超声诊断时，淋巴结形状改变是判定是否转移的重要依据，其主要依据成像结果确定判定结果[13]。由于主观因素易对判断结果造成不必要干扰，所以临床医生自身需具备丰富临床经验。US-CNB属于微创检测方法，主要通过超声扫描判断淋巴结具体情况，对可疑区域进行穿刺取样检测，能够准确确定穿刺部位并取样，有效减轻对机体的损伤，诊断准确度高。与US-FNAC相比可获取更多样本量，具有较高的灵敏度、特异度[14]。同时，所取样本可准确评估该疾病患者相关基因表达情况，为后期治疗方案的确定提供数据支持，有利于加快预后。

本研究发现，观察组灵敏度、特异度、准确度高于对照组，主要是因在对乳腺癌疾病诊断期间，US-CNB准确度高，与金标准相比，对照组所取得的组织标本量相对较少，同时操作者操作技能易对诊断结果产生干扰，导致穿刺病理结果产生误差。在对癌细胞诊断时，血流信号强度大，且信号丰富，尤其是中央穿入性血流信号明显，若病情进展时，极易出现新生滋养动脉，确保肿瘤快速增殖代谢。US-CNB可清晰显示肿物及周边彩色多普勒血流信号，准确反映病变程度。同时，可对淋巴结可疑区域进行穿刺选取标本，能够准确显示淋巴结是否发生病变，因此比US-FNAC的灵敏度、特异度高。因US-CNB取样量相对较多，能够使样本组织结构完整，可避免样本中出现坏死组织、细胞破碎等情况，以此能够减少制片干扰，提升制片质量，从而获取更多病理信息，且在免疫组化的同时，有助于诊断灵敏度、准确度的提升。以上两种诊断方法均可取得一定的诊断效果，但是易受穿刺部位、样本大小等因素的影响，导致误诊、漏诊病例。虽然US-CNB诊断方法具有较高灵敏度、准确度，但是并发症发生率相对较高，所以可考虑与其他诊断方法联用以降低误诊、漏诊率。

本研究仅纳入86例患者，样本量偏少，且未对患者漏诊、误诊情况进行深入分析，易受相关因素影响。因此今后需通过增加样本量进行前瞻性研究，避免研究结果偏倚。同时增加误诊、漏诊率分析，研究影响诊断的相关影响因素，以此获取更为全面、高价值的研究结果，进而为临床治疗提供可靠数据。全面分析治疗中的危险因素，避免对治疗过程与疗效造成干扰。

综上所述，在对乳腺癌疾病患者诊断时，US-CNB免疫组化诊断准确度较高，可清晰显示是否向淋巴结转移，对临床鉴别诊断具有较高价值，可为选择正确治疗方案提供可靠数据支持。