HPLC法测定麦冬中沿阶草酮甲的含量

侯浣波 周慧 余萍 曾品涛 郑一敏

（1四川省第五人民医院，四川 成都 610031；2重庆理工大学药学与生物工程学院，重庆400050；3重庆市现代中药制药工程技术研究中心，400054；4重庆医疗器械质量检验中心，401121）

麦冬（Ophiopogonis Radix）为百合科沿阶草属植物麦冬的块根，广泛使用的常用中药，具有养阴、清心的功效，是一味滋清兼备的补益良药[1]。麦冬的化学成分有甾体皂苷、高异黄酮、多糖、氨基酸、挥发油等[2]。民间诸多抗癌复方中都含有麦冬，临床上麦冬复方也被广泛用于治疗肺癌以及辅助放化疗，并取得很好的疗效[3-4]。为有效控制其质量，作者采用高效液相色谱法测定其中沿阶草酮甲的含量，现报道如下：

1 药品与仪器

Waters高效液相色谱仪（Waters 1525二元泵，Waters 2487紫外检测器）；Breeze液相色谱工作站（Waters公司）；KQ-50型超声波清洗器（昆山市超声波仪器厂）；供试药材购于重庆市桐君阁中药材市场，由重庆理工大学傅善权副主任技师鉴定为百合科沿阶草属植物麦冬（Ophiopogon aponicus(L.f)KerGawl）的块根；沿阶草酮甲对照品（实验室自制，批号101008，纯度为99.5%）；试剂甲醇为色谱纯，水为三蒸水过滤，其他试剂均为AR。

2 方法和结果

2.1 色谱条件

[5-7]选定色谱条件：Hypersil Cl8柱(150 mm×4.6 mm × 5 μm)；流动相：甲醇-水（75∶25）；检测波长：298 nm；柱温：室温。在此条件下沿阶草酮甲的理论塔板数不低于3 000。

2.2 对照品及供试品溶液的制备

精密称取沿阶草酮甲对照品适量，用甲醇，制成0.306mg/mL的溶液，滤过，即得对照品溶液。取麦冬粉末（40目）5 g，精密称定置100 mL具塞锥形瓶中，加入甲醇40 mL，超声提取30 min，过滤；滤渣再加20 mL甲醇，超声提取10 min，过滤；滤渣再加20 mL甲醇，超声提取30 min，过滤，合并三次滤液；滤液减压浓缩至干，残渣加甲醇适量溶解，超声，转移至2 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，经0.45 μm滤膜过滤，即得供试品溶液。

2.3 方法学考察

2.3.1线性关系考察在上述色谱条件下，分别精密吸取“2.2”项对照品溶液 3，6，9，12，15，18 μL 进样，以峰面积对质量进行回归，沿阶草酮甲的回归方程为Y=3 645 282 X－420 010（ r=0.999 76），线性范围为 0.918 ～ 5.508μg。

2.3.2 精密度试验 取“2.2”项下对照品溶液，进样10 μL，连续进样6次，测得沿阶草酮甲峰面积的RSD为0.43%，表明仪器进样精密度良好。

2.3.3稳定性试验取“2.2”项下制备供试品溶液，分别制备后在 0，2，8，12，24 h 进样 10 μL，测定沿阶草酮甲峰面积的RSD为0.75%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

2.3.4重复性试验取同一批麦冬样品，按“2.2”项下的操作平行制备6份供试品溶液，分别进样10 μL，就算沿阶草酮甲含量，其RSD为1.30%，表明该方法的重复性良好。

2.3.5加样回收试验精密称取5份已知含量的同一批麦冬药材粉末，加入适量沿阶草酮甲对照品溶液，按“2.2”项下供试液的制备方法进行制备，将供试液定容至5 mL，经0.45 μm滤膜过滤，进样10 μL,按上述色谱条件测定，计算平均回收率为99.80%，RSD为1.74%。

2.3.6样品的含量测定取样品按“2.2”项下方法制备的供试品溶液，进样10 μL（3次平行），测定峰面积，由外标两点法计算得沿阶草酮甲的含量分别为0.09275‰，0.08728‰和0.093 86‰(表1)，对照品及供试品色谱图见图1。

表1 麦冬中沿阶草酮甲的含量测定结果

图1 沿阶草酮甲对照品(A)与样品图谱（B）

3 讨论

供试品溶液的制备，比较了加热回流提取与超声提取，其测定结果无明显差异，但加热回流提取的杂质比超声提取多，且超声提取较简便，故选择超声提取。还比较了超声提取时间（30，45，60 min），测定结果分别 0.090 30‰，0.090 69‰和0.091 03‰，差异不明显，故选择30 min。文中所建的高效液相色谱法重复性良好，回收率高，且方法简便，快速，易于操作，可作为麦冬中沿阶草酮甲的含量测定方法。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京：化学工业出版社，2005：106-107.

[2]王庆慧，李先，王金辉.麦冬化学成分研究[J].中国现代中药，2009，11（11）：21-22.

[3]汪波，丁德秭.四君子汤合沙参麦冬汤加减配合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌临床观察[J].世界中西医结合杂志，2009，4（8）：564-568.

[4]孙怡.中医治疗肺癌中麦冬的应用[J].中国保健，2008，16（29）：1437-1438.

[5]何利萍，沈钧，郝俊，等.HPLC法测定豆制品中游离异黄酮的含量[J].理化检验：化学分册，2006，42（4）：255-266.

[6]陈乃光，金霞，陈金凤等.HPLC法测定不同产地葛根中四种异黄酮含量[J].中国医师杂志，2005，7（2）：270-271.

[7]夏爱军，黄河舟，高岗等.HPLC法同时测定淫羊藿药材中的5个黄酮类成分[J].药学实践杂志，2009，27（4）：284-285，288.