原花青素对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织中IL－6和ET－1的影响

杨东斌

河南鹤壁市人民医院神经外科 鹤壁 458000

脑缺血再灌注损伤常见于脑部手术的围手术期，其形成是机体自由基过剩、细胞内钙超载、炎症反应、细胞凋亡等共同作用的结果［1］。原花青素（procyanidine，PC）是一大类天然多酚类化合物的总称，具有抗氧化、改善脂质代谢障碍、提高记忆能力、抗凋亡等作用，已被证明能够改善脑缺血再灌注损伤［2－3］，但具体机制尚未完全阐明。本研究主要通过检测脑缺血再灌注损伤后大鼠脑组织中白介素－6（interleukin－6，IL－6）、内皮素－1（endothelin－1，ET－1）水平来探讨原花青素改善脑缺血再灌注损伤的具体机制。

1 材料与方法

1.1材料原花青素（安阳晶森天然产物有限公司，批号：12071101）；全自动多功能酶标仪（美国 Thermo公司）；IL－6、ET－1的ELISA试剂盒（美国eBioscience公司）；健康 Wistar大鼠，雄性，体质量（345±21）g，由河南省实验动物中心提供。

1.2分组及给药40只健康Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、PC高剂量组、PC低剂量组4组。采用改良线栓法［4］制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，其中PC高、低剂量组大鼠术前0.5h和缺血2h时给予浓度为150mg／kg、75 mg／kg的PC溶液，而假手术组和模型组大鼠均给予等体积的生理盐水。各组大鼠均于再灌注24h后处死。

1.3指标检测各组动物处死后，取出大脑组织，称取约100mg的脑组织块用生理盐水制备脑组织匀浆，3500r／min离心10min，取上清液，按照IL－6、ET－1的ELISA试剂盒说明进行各组大鼠脑组织中IL－6、ET－1水平的检测。

1.4统计学处理采用SPSS 17.0进行数据分析，计量资料用（s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较比较采用LSD－t检验，以α＝0.05为检验水准。

表1 PC对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织中IL－6、ET－1水平的影响

2 结果

模型组IL－6、ET－1水平高于假手术组（P＜0.05）。PC高、低剂量组IL－6、ET－1水平低于模型组（P＜0.05）。PC高、低剂量组脑组织中IL－6、ET－1水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）。详见表1。

3 讨论

脑缺血再灌注损伤是一种复杂的病理生理过程，当组织发生缺血并造成一定损伤后，经过积极恢复血流后损伤程度不减轻反而加重的现象即称为脑缺血再灌注损伤。临床上，脑缺血再灌注损伤常见于脑部手术的围手术期，抑制缺血再灌注损伤的发生已成为脑部手术疗效好坏的关键因素［5］。大量研究［2－3，6］表明，脑组织发生缺血再灌注损伤的机制主要有自由基过剩、钙超载、细胞凋亡、炎症反应等，因此如何对抗这些机制已成为改善缺血再灌注损伤的主要途径。已有研究［7］表明，PC能够通过抗氧化、抗凋亡等途径发挥改善脑缺血再灌注损伤的作用。

本研究通过检测缺血再灌注脑组织中IL－6、ET－1水平的变化，分析PC是否通过减轻炎症反应而发挥改善缺血再灌注脑组织损伤的作用，结果显示，模型组IL－6、ET－1水平高于假手术组，提示造模成功；PC高、低剂量组IL－6、ET－1水平均低于模型组，提示PC可能通过减轻大鼠脑组织炎症反应而发挥改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用，同时也进一步验证了PC能够保护发生缺血再灌注损伤的脑组织；PC高、低剂量组脑组织中IL－6、ET－1水平比较差异有统计学意义（P＜0.05），前者的IL－6、ET－1水平均低于后者，提示PC的作用可能具有一定的剂量依赖性。总之，PC能够明显改善脑缺血再灌注损伤，这可能与其减轻炎症反应有关。

［1］陈淑增，王杰华 .氟伐他汀预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织TNF－α及IL－10表达的影响［J］.免疫学杂志，2012，28（4）：309－311，316.

［2］李建玲，何斌，李琳琳 .原花青素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用［J］.中国生化药物杂志，2011，32（6）：463－466.

［3］顾冰 .原花青素在D－半乳糖致衰老大鼠大脑、心脏组织中的抗氧化作用［J］.中国实用神经疾病杂志，2011，14（22）：1－3.

［4］陈香红，张艳 .原花青素对大鼠脑缺血再灌注损伤代谢障碍的影响［J］.中国实用神经疾病杂志，2010，13（22）：15－17.

［5］张均田 .脑缺血、葡萄糖／能量代谢障碍与神经退行性疾病［J］.中国药理学通报，2000，16（3）：241－246.

［6］Annapurna A，Ansari MA，Manjunath PM.Partial role of multiple pathways in infarct size limiting effect of quercetin and rutin against cerebral ischemia－reperfusion injury in rats［J］.Eur Rev Med Pharmacol Sci，2013，17（4）：491－500.

［7］吴岚，刘开祥，俸军林，等 .原花青素对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性和自由基含量的影响［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2009，7（7）：801－803.