大肠癌组织Galectin-3、TIMP-2的表达和临床意义

李英健，赵恩宏，苏 锐，侯 雷，刘志满，申兴斌

(承德医学院附属医院，河北承德 067000)

大肠癌在西方国家的发病率已居第二位，在我国的发病率也在逐年上升[1]。恶性肿瘤难以治愈的原因是肿瘤的浸润和转移。组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)可抑制基质金属蛋白酶-2(MMP-2)对细胞外基质的降解，因此，其表达失控可导致肿瘤细胞的侵袭和转移[2]。由此推测，作为MMP-2的底物，也是β-半乳糖苷结合蛋白(Galectins)重要成员之一的Galectin-3与肿瘤的浸润和转移也密切相关。本研究旨在探讨大肠癌组织Galectin-3和TIMP-2的表达情况及临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 承德医学院附属医院胃肠外科2011年12月-2012年12月手术切除的大肠癌标本52例，同时选取距癌组织边缘＞5cm的正常黏膜20例、大肠腺瘤标本20例作为对照。排除标准:术前行放化疗者;其它部位恶性肿瘤者;免疫性疾病者。52例大肠癌患者中，男29例、女23例，年龄32-75岁，平均年龄54.23±11.06岁。

1.2 方法

1.2.1 免疫组化染色:兔抗人Galectin-3多克隆抗体购自北京中杉金桥公司，兔抗人TIMP-2多克隆抗体购自武汉博士德公司，免疫组化MaxVision试剂盒(羊抗鼠/兔)购自福州迈新生物技术开发有限公司。所取组织标本固定后常规石蜡包埋，厚3 μ m切片，采用SP免疫组化法染色，DAB显色。

1.2.2 结果判定:Galectin-3、TIMP-2免疫阳性产物主要定位于细胞质，呈棕黄色或棕褐色颗粒状。在400倍视野下，每张切片随机观察4个视野，分别根据阳性细胞比例和染色强度计分:①阳性细胞比例:无阳性细胞0分，阳性细胞＜25%计1分，25%-75%计2分，＞75%计3分;②染色强度:染色强度以多数细胞为准，无着色计0分、淡黄色计1分、黄或深黄色计2分、褐或棕褐色计3分。以①+②判定最终结果:0分为-、1-2分为+、3-4分为++、5-6分为+++，其中+为弱阳性、++为中等阳性、+++为强阳性。

1.3 统计分析 应用SPSS 13.0软件进行统计分析，等级资料采用秩和检验，相关分析采用Spearman等级相关分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同大肠组织Galectin-3和TIMP-2的表达情况 大肠癌组织Galectin-3的阳性表达率最高、TIMP-2的阳性表达率最低，与正常大肠黏膜和大肠腺瘤比较差异具有统计学意义(P＜0.01)。见表1:

表1 不同大肠组织Galectin-3和TIMP-2的表达情况

2.2 Galectin-3、TIMP-2表达与大肠癌临床病理参数的关系 大肠癌组织Galectin-3、TIMP-2的表达与年龄、性别、肿瘤位置无关(P＞0.05);与浸润深度、分化程度和淋巴结转移有关(P＜0.01，P＜0.05)。见表2:

表2 Galectin-3、TIMP-2表达与大肠癌临床病理参数的关系

2.3 大肠癌Galectin-3和TIMP-2表达的相关性 大肠癌中，Galectin-3与TIMP-2的表达呈负相关(P＜0.01)。见表3:

表3 大肠癌Galectin-3和TIMP-2表达的相关性

3 讨论

大肠癌致死的主要原因是肿瘤细胞的浸润和转移，基底膜完整性的破坏被认为是恶性肿瘤侵袭的开始。近年来的研究发现[3]，MMP-2可以降解细胞外基质、促进肿瘤血管形成，在肿瘤的侵袭和转移中具有重要作用;但细胞产生的TIMP-2能够抑制MMP-2的活性，从而保持细胞外基质和基底膜的稳定。因此，MMP-2与TIMP-2表达的失衡可导致细胞外基质和基底膜的降解，从而引发肿瘤细胞的侵袭和转移[4]。

本研究发现，大肠癌组织TIMP-2的表达水平明显低于正常大肠黏膜和大肠腺瘤，并且，大肠癌TIMP-2的表达与淋巴结转移、浸润深度和分化程度有关。上述结果提示，大肠癌组织TIMP-2的表达降低，不能抑制MMP-2的活性，打破了MMP-2/TIMP-2的平衡，从而促进肿瘤的侵袭和转移，这与Moran等[5]的研究结果一致。

Galectin-3作为MMP-2的底物，可能在肿瘤的浸润和转移中起到一定作用，而且Galectin-3具有糖亲和性、能够阻止细胞凋亡及参与炎症细胞的游走，因此，Galectin-3的表达增高可通过提高内皮细胞的亲和性和增加细胞聚集促进肿瘤的侵袭和转移[6-9]。本研究发现，大肠癌组织Galectin-3的表达水平明显高于正常大肠黏膜和大肠腺瘤，并且，大肠癌Galectin-3的表达与淋巴结转移、浸润深度和分化程度有关。Shankar等[10]采用免疫组化法研究发现，甲状腺癌肿组织Galectin-3的表达明显高于良性甲状腺病变，与本研究结果相似。

本研究还发现，大肠癌Galectin-3和TIMP-2的表达呈负相关，进一步说明二者参与了大肠癌的发生发展过程，也提示临床，是否能通过改变TIMP-2和Galectin-3的表达情况，抑制肿瘤的侵袭和转移，从而改善大肠癌患者的预后。因此，本研究为基因治疗大肠癌提供了参考依据。

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