抗α-胞衬蛋白抗体用于干燥综合征诊断的临床价值

马　倩，项　楠，李向培，厉小梅，汪国生，马　艳，张　宏，王　玮，陈　磊

(安徽医科大学附属安徽省立医院风湿免疫科，合肥 230001)

干燥综合征(Sjögren syndrome，SS)是一种以主要累及外分泌腺体为特征的自身免疫性疾病，多见于女性，发病机制尚未明。干燥综合征患者除常表现为口干、眼干外，还包括关节炎、周围神经病变和肺纤维化等表现。唾液腺和泪腺组织的导管及血管周围有淋巴细胞浸润是该病的病理特征[1]。依据是否合并存在其他结缔组织病(connective tissue diseases，CTD)，如系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)、类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)等，将其分为原发性干燥综合征(primary Sjögren’s syndrome，pSS)和继发性干燥综合征(secondary Sjögren’s syndrome，sSS)[2]。诊断SS多依赖于临床表现、血清抗体、有创性唇腺活检和腮腺造影等。SS患者血清中可存在多种自身免疫性抗体，如抗SSA抗体(Anti-SSA autoantibody)、抗SSB抗体(Anti-SSB autoantibody)、抗核抗体(antinuclear antibody，ANA)、类风湿因子(rheumatoid factor，RF)，对SS诊断有一定价值，但敏感性及特异性并不理想[3]。因此，SS诊断仍需寻找更为敏感、特异的检测方法。

1997年有研究报道，在SS模型-NFS/sld小鼠的唇腺组织中提取了一种器官特异性自身抗原，即α-胞衬蛋白，发现其在SS中有重要意义，并指出其抗体——抗α-胞衬蛋白抗体有助于诊断SS[4]。后相继有研究报道，α-胞衬蛋白可能参与SS发病，其抗体抗α-胞衬蛋白抗体可能是SS标志之一，具有较高的敏感性、特异性。但也有不少研究持相反观点，提出抗α-胞衬蛋白抗体在SS中的敏感性和特异性并不高，认为其对诊断SS的价值并不理想。目前，国内外研究结果不一，本研究的目的是进一步探讨抗α-胞衬蛋白抗体对诊断SS的敏感性及特异性，并结合其他相关免疫学指标，探讨其在SS的临床诊断价值。

对象与方法

对象及分组

选取2011年8月至2013年10月在安徽省立医院确诊的SS患者，参照SS国际诊断标准(2002年修订)[2]，血清学阴性者均为唇腺活检病理阳性。所有纳入SS患者均纳入SS组，且分为pSS组和sSS组。选取CTD患者纳入CTD组，其中SLE符合1997年美国风湿病协会修订的SLE分类标准，RA符合1987年美国风湿病协会修订的RA分类标准，分为SLE组和RA组。选取关节痛、骨关节炎、口眼干燥症、糖尿病等患者纳入非CTD对照组，非CTD对照组患者均无自身免疫性疾病史。

方法

采用酶联免疫吸附法定性检测IgG型抗α-胞衬蛋白抗体，依据试剂盒(上海科新)的检测方法进行实验。样本被酶催化成为有色产物，通过全自动酶标仪检测待检血清和对照品在一定波长下的吸光度，可判断待检血清中抗α-Fodrin 抗体是否阳性。用酶标仪测定吸光光度值(optical density，OD)，计算样本与弱阳性对照品的光吸收值比率，光吸收值比率=样本OD值/弱阳性对照品OD值，其中光吸收值比率<1，为阴性；比率≥1，为阳性；0.9≤比率≤1.1，为临界区域。ANA采用间接免疫荧光法检测，可提取性核抗原(extractable nuclear antigen，ENA)利用欧盟斑点法检测，RF利用免疫比浊检测法。

统计学处理

应用SPSS 13.0软件进行数据统计分析。利用四格表计算各组各指标的敏感性、特异性。利用四格表配对资料χ2检验统计各指标在各组中的分布差异，以P<0.05为差异有统计学意义。

结　　果

一般资料

2011年8月至2013年10月确诊SS患者304例，其中实验室数据完整的253例纳入SS组。253例患者中，pSS 204例(pSS组)，男7例，女197例(男：女为1∶28)，年龄13～82岁，平均(48.9±13.6)岁。剩余49例为sSS患者(sSS组)，男2例，女47例(男：女为1∶23)，年龄22～84岁，平均(49.6±14.9)岁，其中继发于SLE 26例，继发于RA 23例。

CTD组60例，男1例，女59例，年龄14～73岁，平均(43.4±15.0)岁，其中SLE 38例(SLE组)，RA 22例(RA组)。非CTD对照组105例，男5例，女100例，年龄14～83岁，平均(49.0±15.8)岁。

病例组和非CTD对照组间性别、年龄差异均无统计学意义(P>0.05)。

抗α-胞衬蛋白抗体阳性率

pSS组抗α-胞衬蛋白抗体阳性率最高，为52.0%；非CTD对照组阳性率最低，为15.2%(表1)。

抗α-胞衬蛋白抗体敏感性和特异性

抗α-胞衬蛋白抗体在SS组、pSS组、sSS组的敏感性、特异性均高于非CTD对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；SS组和pSS组的敏感性、特异性均高于RA组和SLE组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；sSS组特异性低于SS组和pSS组，差异有统计学意义(P<0.05)(表2)。

表1　各组抗α-胞衬蛋白抗体阳性率

SS：干燥综合征；pSS：原发性SS；sSS：继发性SS；RA：类风湿关节炎；SLE：系统性红斑狼疮；CTD：结缔组织病

SS患者抗α-胞衬蛋白与其他自身抗体敏感性、特异性比较

253例SS患者，ANA和抗SSA抗体敏感性高于抗α-胞衬蛋白抗体，但特异性低于抗α-胞衬蛋白抗体，差异均有统计学意义(P<0.05)；抗SSB抗体特异性高于抗α-胞衬蛋白抗体，但敏感性较低，差异有统计学意义(P<0.05)(表3)。

自身抗体阴性SS患者抗α-胞衬蛋白抗体阳性表达

抗SSA抗体阴性SS患者的抗α-胞衬蛋白抗体阳性率为62.0%(49/79)；抗SSB抗体阴性SS患者的抗α-胞衬蛋白抗体阳性率为55.1%(97/176)。ANA阴性SS患者的抗α-胞衬蛋白抗体阳性率为57.9%(11/19)；ANA、抗SSA抗体、抗SSB抗体均阴性SS患者的抗α-胞衬蛋白抗体阳性率为62.5%(10/16)。

表2　各组抗α-胞衬蛋白抗体敏感性、特异性比较

SS：干燥综合征；pSS：原发性SS；sSS：继发性SS；RA：类风湿关节炎；SLE：系统性红斑狼疮；CTD：结缔组织病；a与非CTD对照组比较，P<0.05；b与SS组、pSS组比较，P<0.05；c与非CTD对照组比较，P<0.05；d与SS组、pSS组比较，P<0.05

表3　SS患者自身抗体敏感性、特异性比较

SS：干燥综合征；ANA：抗核抗体；*与抗α-胞衬蛋白抗体敏感性比较，P<0.05；#与抗α-胞衬蛋白抗体特异性比较，P<0.05

SS患者抗SSA、抗SSB与抗α-胞衬蛋白抗体联合检测结果

抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗α-胞衬蛋白抗体均阳性者为42.5%(31/73)。

讨　　论

SS的发病机制尚不明了，诊断SS较常用血清抗体如ANA、抗SSA、抗SSB、RF的特异性和敏感性均有限，而有创性检查患者依从性较差。Haneji等[4]首先发现，SS模型小鼠唇腺中一种相对分子质量为120 000的唇腺特异性自身抗原——α-胞衬蛋白，其可诱导正常小鼠产生SS相关症状，表明α-胞衬蛋白可能与SS发病相关[5]。有学者利用α-胞衬蛋白早期免疫NOD小鼠后产生抗α-胞衬蛋白抗体、颌下腺中存在浸润的淋巴细胞，并证实靶向α-胞衬蛋白的治疗可抑制SS发生[6]。Markus等[7]的研究指出，羟氯喹可改善SS患者口眼干燥症状，且对抗α-胞衬蛋白抗体阳性患者的治疗效果更为显著，提示抗α-胞衬蛋白抗体可能与SS疾病的活动度相关，参与炎性反应。Bendaoud等[8]发现，抗α-胞衬蛋白IgG型抗体可能与病情活动性相关，可作为疾病活动的标志性抗体。上述研究均提示，抗α-胞衬蛋白抗体对诊断SS的筛选有一定价值。

目前，国内外多项研究对抗α-胞衬蛋白抗体看法不一。有研究发现，pSS、sSS患者抗α-胞衬蛋白抗体阳性率分别为95.3%、50%，而SLE、RA及健康人中未发现抗α-胞衬蛋白抗体，认为其对诊断SS敏感性和特异性较高，从而推测抗α-胞衬蛋白抗体可能是SS标志性抗体。也有学者检测到，IgG型抗体的敏感性分别为为48%、10%，低于抗SSA、抗SSB的敏感性[9]。Nuran等[10]发现，pSS、sSS患者抗α-胞衬蛋白抗体、抗SSA和抗SSB抗体的敏感性与Michiel等[9]研究一致，认为抗α-胞衬蛋白抗体在诊断SS中的价值不大。我国赵岩等[11]研究报道，pSS、sSS患者的抗α-胞衬蛋白抗体的敏感性分别为59.7%、37.5%，特异性为79.4%，且抗α-胞衬蛋白抗体在SS和其他CTD中的敏感性差异无统计学意义。本研究发现，SS患者抗α-胞衬蛋白抗体的敏感性和特异性分别为51.4%、81.8%，该研究结果部分与赵岩等[11]的研究结果一致；但SS组、pSS组的敏感性、特异性均高于RA组、SLE组。本研究发现，与其他自身抗体比较，抗α-胞衬蛋白抗体敏感性低于ANA、抗SSA抗体，特异性低于抗SSB抗体。本研究结果提示，抗α-胞衬蛋白抗体在pSS与sSS中的阳性率未见明显差异，但在SS中的阳性率高于RA、SLE及非CTD对照组，表明抗α-胞衬蛋白抗体对诊断SS有一定的临床价值。另外，本研究还发现，非CTD对照组抗α-胞衬蛋白抗体也有15.2%的阳性率，提示单一出现抗α-胞衬蛋白抗体时，诊断SS需谨慎，应注意与其他疾病鉴别。

何菁等[12]采用酶联免疫吸附法检测SS患者血清抗α-胞衬蛋白抗体，验证了其为SS诊断较特异的抗体，并对其诊断其他抗体阴性的SS有参考意义。在另1项研究中，作者提出抗SSA或抗SSB抗体与抗α-胞衬蛋白联合抗体检测可显著提高诊断pSS的敏感性，且抗SSB抗体、抗α-胞衬蛋白抗体特异性较高[13]。本研究发现，在ANA、抗SSA、抗SSB抗体均阴性的SS患者中，抗α-胞衬蛋白抗体阳性率为62.5%，对于上述血清抗体阴性的SS诊断有所帮助。也有研究报道，抗α-胞衬蛋白抗体可能在尚未确诊的SS即可阳性，推断其可能作为SS早期标志性抗体[14]。

本研究重点观察了抗SSA、抗SSB阴性的SS患者的抗α-胞衬蛋白的阳性率，提示抗α-胞衬蛋白检测可以作为抗SSA、抗SSB阴性的SS患者的补充血清学指标。目前，各研究报道结果不一致的原因可能与不同的检测方法、SS诊断标准、病例选择等相关。本研究纳入大量病例，结果显示在SS中的抗α-胞衬蛋白抗体的敏感性及特异性均高于RA、SLE及非CTD对照组，可作为SS诊断性抗体之一，但其敏感性及特异性仍有限，笔者认为抗α-胞衬蛋白抗体仍不可完全取代其他抗体在SS诊断中的意义，可作为SS诊断的联合检测指标。而在其他抗体阴性、临床高度疑诊为SS的患者，抗α-胞衬蛋白抗体阳性有一定的辅助诊断价值。

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