河北省12 352例农村妇女人乳头瘤病毒高危亚型筛查结果分析

赵庆伟，马书军，刘　云，裴菲菲

(河北省妇幼保健中心，河北 石家庄 050031)



河北省12 352例农村妇女人乳头瘤病毒高危亚型筛查结果分析

赵庆伟，马书军，刘云，裴菲菲

(河北省妇幼保健中心，河北 石家庄 050031)

[摘要]目的了解河北省农村妇女人乳头瘤病毒高危亚型(HPV-HR)感染及其基因分布情况，为预防子宫颈癌前病变及子宫颈癌提供参考依据。方法以2014年8月至2015年8月在河北省妇幼保健中心进行人乳头瘤病毒高危亚型筛查的12 352例农村妇女作为研究对象，按年龄分成4组：31～40岁组、41～50岁组、51～60岁组、60～70岁组。采用荧光定量PCR技术进行人乳头瘤病毒高危亚型筛查。结果在12 352例受检者中HPV-HR感染率占10.29%(1271/12 352)，其中31～40岁组HPV-HR感染率占11.36%(364/3 205)、41～50岁组HPV-HR感染率占10.15%(560/5 515)、51～60岁组占9.86%(293/2 972)、60～70岁组HPV-HR感染率占8.18%(54/660)，31～40岁组与61～岁组HPV-HR总感染率差异具有统计学意义(χ2=5.72，P<0.05)，其他各组之间HPV-HR总感染率差异无统计学意义(均P>0.05)。在1 271例HPV-HR感染病例中，HPV-16、HPV-18感染和HPV-16、HPV-18合并其他12种HPV高危亚型(HPV-HR12)感染占26.67%(339/1 271)，HPV-HR12(包括：HPV-31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68)感染者932例，占所有感染病例的73.33%(932/1 271)。结论河北省农村妇女人乳头瘤病毒高危亚型(HPV-HR)感染处于中等水平，并且HPV-16型具有较高的感染率；31～40岁的年轻女性HPV-HR感染率达最高，随着年龄的增高，感染比例逐步缓慢减少。该结果对农村妇女宫颈癌防治和农村妇女HPV-HR筛查策略的实施具有指导意义。

[关键词]农村妇女；人乳头瘤病毒；高危亚型；筛查

在全球范围内，宫颈癌的发病率和死亡率均较高。全世界每年因宫颈癌死亡的人数约30万，而新发宫颈癌病例更高达50万人[1]。流行病学和生物学资料已经证明人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)感染是子宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)及宫颈癌的主要病因，尤其是高危亚型HPV感染[2]。HPV感染状况具有很强的地域性，不同国家与地区HPV感染基因分型的流行病学分布不同[3]。为研究河北省农村妇女HPV感染及其基因型分布情况，本研究利用多色荧光PCR技术对12 352名农村妇女进行HPV高危亚型检测，为宫颈癌防治提供依据。

1资料与方法

1.1研究对象

以2014年8月至2015年8月在河北省妇幼保健中心进行人乳头瘤病毒高危亚型筛查的12 352例农村妇女作为研究对象。纳入标准：户籍在宁晋、涞水、滦南、丰宁4个县的农村已婚妇女，年龄31～70岁，平均年龄44.36±6.78岁，自愿参加并且能接受检查者；排除标准：因非宫颈癌或非宫颈病变原因行子宫全切术者。把以上就检者按年龄分成四组,其中31～40岁组3 205例、41～50岁组5 515例、51～60岁组2 972例、60～70岁组660例。

1.2标本采集

宫颈刷和宫颈样本保存管由石家庄新世纪生物工程有限公司提供。暴露宫颈，擦除宫颈粘液。将宫颈刷插入宫颈口1～1.5cm，直至最外侧刷毛触到外宫颈，逆时针方向旋转5圈取样，抽出宫颈刷，放入加有专用保存液的保存管中送检。样本于4℃保存，冷链送河北省妇幼保健中心实验室，48小时内完成检测。

1.3仪器与试剂

采用罗氏公司生产的COBAS4800全自动HPV核酸检测系统，HPV检测试剂盒及全部耗材由罗氏公司提供。

1.4检测方法

检测HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68共14种高危亚型，并同时分型HPV16和HPV18型，其他12种高危亚型不再具体分型。检测通道：FAM通道检测12种高危型、JOE通道检测HPV16型、ROX通道检测HPV18型、CY5通道检测β-globin内参。操作按照SOP文件执行，操作步骤包括：①上样，包括样本上机、耗材上机、试剂上机；②样本DNA提取和PCR反应体系制备，以上过程均由仪器自动完成；③封膜转板，取出PCR反应体系板，用透明膜密封，放入COBAS 480 Z 实时定量荧光PCR仪； ④PCR扩增与荧光检测，扩增程序为50℃反应2min ，经95℃ 10min进入循环，循环温度及时间为95℃ 15s、60℃ 60s共50个循环，60℃时检测荧光；⑤结果判读：阴阳性质控在控，样本在FAM、HEX、ROX荧光检测通道CT值≤40，其内对照β-globin在Cy5荧光检测通道CT值≤40，结果仪器自动判断为阳性；阴阳性质控在控，样本在FAM、HEX、ROX荧光检测通道CT值≥40，其内对照β-globin在Cy5荧光检测通道CT值≤40，结果仪器自动判断为阴性，否则无论是阴阳性质控失控或其内对照β-globin在Cy5荧光检测通道CT值≥40，仪器均自动判定为无效。

1.5统计学方法

采用SPSS 11.5统计软件对数据进行统计学处理，各组间HPV高危亚型感染检出率差异用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 人乳头瘤病毒高危亚型总体感染状况

12 352例样本中检出HPV高危亚型1 271例，总感染率为10.29%(1271/12 352)。各HPV高危亚型感染频数及构成比见表1。

表1HPV高危亚型总体分布

Table 1 Overall distribution of HPV-HR subtypes

2.2 人乳头瘤病毒高危亚型感染的年龄分布

各年龄组HPV高危亚型总感染情况见表2及图1，其中31～40岁组HPV高危亚型感染率最高，与61～岁组差异有统计学意义(χ2=5.72，P<0.05),其余各组之间HPV高危亚型总感染率差异无统计学意义(均P>0.05)。

表2HPV高危亚型总体感染的年龄分布状况[n(%)]

Table 2Distribution of age of cases infected with HPV-HR[n(%)]

图1各年龄组HPV-HR感染率分布状况

Fig.1 Infection rate distribution of HPV-HR among different age groups

2.3不同年龄组人乳头瘤病毒高危亚型型别分布

各年龄组HPV高危亚型型别分布见表3，数据显示本地区HPV18型感染率较低，HPV16和HPV-HR12型感染率较高。

表3不同年龄组HPV高危亚型型别分布[n(%)]

Table3Distribution of HPV-HR subtypes among

注：*包括合并其他型别感染。

3讨论

3.1感染率及基因型分布规律及特点

本研究以国家农村妇女宫颈癌筛查项目为依托，标本来源于河北省东西南北方位4个县多个自然村，具有普遍的代表性，标本量较大能较好地反映河北省农村妇女HPV高危亚型的感染状况。研究结果显示我省农村妇女HPV高危型总感染率为10.29%，远远低于樊静等[4]报道的陕西省的26.26%，高于北京地区HPV总体感染率6.6%[5], 与新疆的13%[6]相近。远远低于美国2014年报道的HPV感染率42.5%～42.7%[7]，说明了河北省农村妇女HPV感染处于中等水平，以上结果反映了不同地区和人群HPV流行的地域差别和人群差别。与本地区HPV各亚型的人群携带率，生活习惯以及人群基因易感性是否有关有待进一步研究。本次研究共检出HPV16型262例(含合并其他型)，阳性占比为20.61%，与其他型别相比具有较高的感染率，这与国际癌症研究所研究发现的结果一致[3,7]。共检出HPV18型85例，感染率0.69%，阳性占比为6.69%。检出HPV-HR12型932例(不含合并16、18型)，感染率为7.55%，占所有阳性病例的73.33%，本实验方法不能具体区分哪种亚型感染，但由于临床上对HPV-HR12亚型的处理原则一样，所以并不影响临床的处理。

3.2年龄分布特点

本研究显示31～40岁HPV高危亚型的感染率最高为11.36%，这与北京地区[8]筛查的人群感染高峰年龄在30～34岁之间(检出率为11.25%)相一致，考虑与年轻女性性活动旺盛，生殖道局部和全身免疫系统未经致敏，易被HPV感染有关。随着年龄的增长，性阅历的丰富，女性生殖道局部和全身免疫系统将被致敏并逐渐发育成熟，抗病能力相应增强[8]，感染率逐渐下降，这与国内外研究结果一致[8-9]。HPV感染绝大多数为隐匿性、一过性感染，仅持续一段时间后便被机体自然清除，但可重复感染，HPV高危亚型持续感染，则很可能使宫颈的细胞学形态发生异常改变，进一步发生宫颈癌前病变及宫颈癌。据文献报道：宫颈原位癌高发年龄为30～35岁，浸润癌为45～55岁，近年来其发病有年轻化趋势[9]。本研究发现农村妇女中HPV高危亚型感染在31～70岁各年龄段均有一定的感染率，最低为61～70岁组，但仍高达8.18%，因此提醒广大农村妇女均应积极进行HPV高危亚型检测。

一项研究报道，中国农村妇女的宫颈癌死亡率远远高于全国的平均水平[10]，这与农村宫颈癌筛查普及率低有关。农村妇女由于受经济条件、医疗资源的限制，保健意识差，对宫颈癌筛查的重要性了解较少，除了参与免费宫颈癌筛查项目外，只有少数女性每年主动进行宫颈癌筛查，这就错过了早期发现宫颈癌前病变的机会，因此错过了最好治疗时机。要想降低农村宫颈癌的死亡率，只有加大农村妇女宫颈癌筛查的宣传力度，大力推广宫颈癌筛查，由于HPV DNA检测敏感度高于细胞学检查[11]，因此在农村地区开展HPV高危亚型筛查意义重大。

通过本次研究使我们认识到本地区农村妇女宫颈HPV高危亚型感染的基因分布及年龄特点，为宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的区域性防治提供了必要的病毒流行病学数据和临床病例分流依据，对进一步推广农村妇女HPV高危亚型筛查策略具有切实参考意义。

[参考文献]

[1]Vidart Aragon J A. New strategies for secondary prevention of cervical cancer [J]. An R Acad Nac Med(Madr),2012,129(1):137-146.

[2]吴冬梅,郑怡真,刘倩,等.高级别宫颈上皮内瘤变中医证型分布及其与高危型HPV负荷量关系的研究[J].光明中医,2012,27(3):489-491.

[3]Dillner J. Prevention of human papillomavirus-associated cancers[J].Semin Oncol,2015,42(2):272-283

[4]樊静,李娜,张忠明,等.陕西省宫颈人乳头瘤病毒感染亚型分布特征分析[J].中国妇幼健康研究,2015,26(5):958-961.

[5]赵蓉,张为远,张淞文,等.2006-2008年北京地区25～54岁育龄妇女HPV亚型感染状况的调查[J].中华妇产科杂志,2011,46(3):184-187.

[6]Mijit F,Ablimit T,Abduxkur G,etal.Distribution of human papillomavirus(HPV) genotypes detected by routine pap smear in uyghur-muslim women from Karasay Township Hotan(Xinjiang,china)[J].J Med Virol,2015,87(11):1960-1965.

[7]Steinau M,Hariri S,Gillison M L,etal. Prevalence of cervical and oral human papillomavirus infections among US women[J].J Infect Dis, 2014,209(11):1739-1743.

[8]段山红,安瑞芳.HPV感染亚型分布及其与宫颈病变关系的研究[J].中国妇幼健康研究,2015,26(5):955-958.

[9]Shi J F,Canfell K,Lew J B,etal. The burden of cervical cancer in China:synthesis of the evidence[J].Int J Cancer,2012,130(3):641-652.

[10]董航,刘华章,林国桢,等.广州市2000-2011年宫颈癌发病趋势及年龄分布特征[J].中华疾病控制杂志,2015,19(5):451-453.

[11]Naucler P, Ryd W, Tornberg S,etal.Efficacy of HPV DNA testing with cytology triage and/or repeat HPV DNA testing in primary cervical cancer screening[J].J Natl Cancer Inst,2009,101(2):88-99.

[专业责任编辑：安瑞芳]

Results of human papillomavirus high risk subtypes screening of 12 352 rural women in Hebei Province

ZHAO Qing-wei, MA Shu-jun, LIU Yun, PEI Fei-fei

(Hebei Provincial Maternity and Child Healthcare Center, Hebei Shijiazhuang 050031, China)

[Key words]rural women; human papillomavirus (HPV); high-risk subtypes; screening

[Abstract]Objective To understand the epidemic situation of human papillomavirus high risk (HPV-HR) infection and its gene distribution among rural women in Hebei Province, so as to provide reference for prevention of cervical precancerous lesions and cervical cancer. Methods Totally 12 352 rural women taking HPV-HR examination in Hebei Provincial Maternity and Child Healthcare Center from August 2014 to August 2015 were selected and divided into four age groups: 31-40 years-old group, 41-50 years-old group, 51-60 years-old group and 61-70 years-old group. The multi-color real time fluorescence quantitative PCR technique was used for HPV-HR screening. Results The infection rate of HPV-HR among 12 352 rural women was 10.29% (1 271/12 352). The infection rate of HPV-HR in 31-40 years-old group was 11.36% (364/3 205), in 41-50 years-old group was 10.15% (560/5 515), in 51-60 years-old group was 9.86% (293/2 972), and in 61-70 years-old group was 8.18 (54/660). The difference in HPV-HR infection rate was statistically significant between 31-40 years-old group and 61-70 years-old group (χ2=5.72,P<0.05), but it was not significant among other groups (allP>0.05). The infection rate of HPV-16, HPV-18 and HPV-16/HPV-18 combined with other 12 HPV high-risk subtypes (HPV-HR12) accounted for 26.67% (339/1 271). There were 932 cases infected with HPV-HR12 (including HPV-31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 and 68), which accounted for 73.33% (932/1 271) of HPV-HR infection cases. Conclusion The infection rate of HPV-HR among rural women is medium level in Hebei Province, and the infection rate of HPV-16 is higher. The infection rate of HPV-HR reached peak among young women aged 31-40 years old, and it declines gradually with age increasing. The data are helpful for cervical cancer prevention and implement of HPV-HR screening strategy for rural women.

[收稿日期]2015-12-03

[作者简介]赵庆伟(1976-)，女，主管护师，主要从事妇科常见病和宫颈癌筛查方面的研究。

[通讯作者]马书军，副主任技师。

doi:10.3969/j.issn.1673-5293.2016.05.035

[中图分类号]R711

[文献标识码]A

[文章编号]1673-5293(2016)05-0654-03