老年高血压合并IGT患者血清CRP和NF-κB蛋白水平的变化

卢跃 陈群 夏奇奂 杜斌 (浙江省荣军医院重症医学科，浙江 嘉兴 314000)

原发性高血压可合并多种代谢紊乱，如糖代谢异常、血脂异常及高尿酸血症等，其中以糖耐量减低(IGT)常见〔1,2〕。临床调查显示，原发性高血压患者30%～50%伴不同程度IGT，若不采取及时有效的诊断和治疗可进展为糖尿病，且明显增加各种心血管疾病发生率和病死率〔3,4〕。炎症在高血压发生发展、转归中的作用越来越明显，其中C反应蛋白(CRP)是主要的促炎细胞因子之一〔5〕。核因子(NF)-кB属于活跃性较高的转录因子，在多种炎症介质及细胞因子基因的表达调控中均有积极参与作用，从而介导细胞凋亡，是人体正常生命活动中的必要因子〔6〕。本研究旨在探讨老年高血压合并IGT患者血清CRP和NF-κB蛋白水平的变化。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择浙江省荣军医院于2018年1～12月收治的老年原发性高血压患者55例，其中单纯高血压28例(单纯组)，高血压合并IGT患者27例(合并组)。依据《中国高血压防治指南2010》中关于原发性高血压诊断标准，依据1999年世界卫生组织(WHO)制定IGT诊断标准。纳入标准：①符合高血压和IGT诊断标准；②年龄60～80岁；③临床资料完整。排除标准：①高血压急症、继发性高血压及应激性高血糖；②合并心、肺、肝、肾严重异常者；③自身免疫系统疾病、感染性疾病及造血系统疾病者；④精神疾病者。单纯组男15例，女13例；年龄61～80岁，平均(68.03±4.72)岁；病程3～23年，平均(12.83±3.45)年。合并组男12例，女15例；年龄62～79岁，平均(69.32±5.16)岁；高血压病程3～21年，平均(13.02±3.61)年。另选择我院同期健康体检者25例为正常组，其中男13例，女12例；年龄60～80岁，平均(68.73±5.14)岁。各组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2血压监测方法及诊断标准 选择台式水银柱血压计对右肱动脉血压进行测量，依据Korotkoff 5期法计算血压读数的3次平均值作为最终数据，收缩压≥140 mmHg和(或)舒张压≥90 mmHg，可确诊为高血压。

1.3血糖检测及葡萄糖耐量试验(OGTT) 受试者晨起空腹状态下，抽取受试者静脉血进行血糖测定，记录空腹血糖值。然后口服75 g葡萄糖静待2 h 后，再次抽取静脉血测定血糖，记录餐后2 h血糖值。其中以空腹血糖≥7.0 mmol/L或OGTT 2 h血糖≥11.1 mmol/L确诊为糖尿病；其中以空腹血糖<5.6 mmol/L且OGTT 2 h血糖<7.8 mmol/L为正常；其中以空腹血糖<5.6 mmol/L且7.8≤OGTT 2 h血糖≤11.0 mmol/L为糖耐量减低。

1.4免疫组化法测定NF-κB表达 取受试者外周静脉血3 ml，取乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝的外周血，采用红细胞裂解液裂解红细胞后，取有核细胞2×105个进行细胞固定和穿透，重悬于200 μl细胞穿透液体中，加入NF-κB(美国Santa Cruz公司)抗体，以免疫组织化学SP法检测NF-κB表达，由同一病理科人员严格依据北京中杉金桥生物公司免疫组织化学SP法试剂盒检测，以已知抗体阳性标本作为阳性对照，且以磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.5血清CRP水平测定 取受试者外周静脉血3 ml，以离心半径10 cm、2 500 r/min离心10 min，取上清液，采用免疫散射比浊法测定血清CRP水平，检测仪器为美国德灵BN Ⅱ型全自动特定蛋白分析仪及配套试剂。

1.6统计学方法 运用SPSS19.0软件进行χ2检验、t检验、F检验及Pearson相关分析。

2 结 果

2.1各组收缩压、舒张压、空腹血糖和餐后2 h血糖比较 单纯组和合并组收缩压和舒张压显著高于正常组(P<0.05)；而单纯组和合并组差异无统计学意义(P>0.05)。合并组餐后2 h血糖显著高于单纯组和正常组(P<0.05)；而单纯组和正常组差异无统计学意义(P>0.05)；各组空腹血糖比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 各组收缩压、舒张压、空腹血糖和餐后2 h血糖变化比较

2.2各组NF-κB阳性表达率比较 单纯组和合并组NF-κB阳性表达率〔(25.72±8.12)%、(38.28±11.03)%〕显著高于正常组〔(11.17±3.62)%〕，合并组显著高于单纯组(P<0.05)，3组比较差异有统计学意义(F=69.886，P<0.05)。见图1。

图1 NF-κB阳性表达(免疫组化，×200)

2.3各组血清CRP水平比较 单纯组和合并组血清CRP水平〔(8.64±2.13)、(13.81±3.92)mg/L〕显著高于正常组〔(3.14±0.98)mg/L〕，合并组显著高于单纯组(P<0.05)。3组比较差异有统计学意义(F=104.87，P<0.05)。

2.4相关性分析 高血压合并IGT患者餐后2 h血糖与NF-κB和CRP呈线性正相关(r=0.785、0.714，均P<0.05)；NF-κB与CRP呈线性正相关(r=0.723,P<0.05)。

3 讨 论

近年来关于糖尿病发病的炎症学说越来越受到重视，并认为糖尿病是全身慢性低度炎症性疾病及自然免疫系统激活的炎症性疾病。而其中糖尿病炎症学说提出了关于糖尿病及IGT发病机制尤为重要。IGT是糖尿病的前期阶段，而糖尿病转化为大血管疾病的危险性增加为其危害性表现。临床调查显示，原发性高血压约50%患者会伴不同程度胰岛素抵抗，而其中胰岛素抵抗示机体对胰岛素处理葡萄糖能力下降，且OGTT能够发现糖耐量减低〔7〕。近年来研究发现，亚临床慢性炎症反应可能是糖耐量减低及胰岛素抵抗发生的重要因素〔8〕。

NF-κB主要是由两个亚基组成的一种DNA结合蛋白，许多刺激因子如LPS、病毒蛋白、氧自由基、紫外线辐射及炎症细胞因子等均可使NF-κB发生磷酸化而处于一种活化状态〔9〕。而其中活化的NF-κB二聚体转入胞核，与DNA的κB反应元件结合，从而调节细胞黏附因子、免疫受体、肿瘤坏死因子、集落刺激因子及白细胞介素等靶基因的表达，且与细胞凋亡、细胞增殖和炎症反应等相关〔10〕。NF-κB主要表达在血管内皮细胞和外周血单个细胞核，主要参与多种细胞因子及细胞介质基因的表达调控和介导细胞凋亡。NF-κB被激活后能够与具有κB序列的基因结合，从而调控相应基因的表达，进一步参与细胞增殖、分化、凋亡及免疫调节和炎症等过程〔11〕。CRP与白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α共同作用可引起胰岛素抵抗，导致动脉粥样硬化、内皮功能紊乱、血糖升高及脂质代谢紊乱〔12～14〕。CRP可能导致炎症反应加重而减轻组织细胞对胰岛素的敏感性〔15，16〕。IGT状态下低度炎症机制尚未完全阐明。IGT状态下主要以胰岛素抵抗为中心的多种代谢异常可导致氧化应激增加，引发一系列促炎反应，促使CRP增加〔17，18〕。

综上，老年原发性高血压合并IGT患者NF-κB和CRP表达上升，且与餐后2 h血糖呈线性正相关，NF-κB与CRP呈线性正相关。