四川省甘孜州部分地区藏猪消化道寄生虫感染情况调查

杨丹娇,张 敏,王俊伟,张 敏,刘怡雯,且华敏,田 维,赵光辉,叶忠明*,宋军科*

(1.甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所,四川康定 626000;2.西北农林科技大学动物医学院,陕西杨陵 712100;3.焦作市动物疫病预防控制中心,河南焦作 454003)

藏猪(Tibetan pig)主要分布在西藏、青海、云南、甘肃、四川甘孜州和阿坝州等海拔3 000 m以上的高山草地地区[1]。藏猪养殖多以散养放牧为主,且受养殖技术、饲养管理和疾病等因素的影响,藏猪养殖过程中疾病的发生率呈逐年上升趋势[2]。对西藏林芝地区藏猪肠道寄生虫感染情况调查发现[3-4],藏猪存在线虫、绦虫、棘头虫、吸虫、原虫等寄生虫感染,总感染率高达64.34%(460/715)。藏猪的寄生虫感染可持续消耗猪营养,造成猪营养不良、发育缓慢、降低饲料转化率、增加养殖成本、降低养殖效益,感染还会引起继发感染,严重者引起死亡,给当地牧民带来严重的经济损失[5]。藏猪养殖是甘孜州传统优势产业和农民增收的支柱产业,本文对甘孜州7个地区不同养殖场的藏猪新鲜粪便样品中寄生虫感染进行了调查,以期为当地藏猪寄生虫病的有效防控提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 粪便样本 2022年1月至2023年2月,共采集甘孜州7个地区藏猪养殖场176份新鲜藏猪粪便样品(表1),其中腹泻粪便68份, 非腹泻粪便样本108份。将采集到的新鲜粪便样品逐一装入干净塑料袋内,详细标注信息后立即带回实验室4℃保存备检。

表1 临床样本信息

1.1.2 主要试剂 蒸馏水,实验室自制;精制盐,中盐榆林盐化有限公司产品。

1.1.3 主要仪器 改良麦克马斯特计数板,河南农业大学寄生虫教研室提供;显微镜,重庆奥特光学仪器有限公司产品;立式压力蒸汽灭菌器,上海博讯实业有限公司医疗设备厂产品;冰箱,青岛海尔股份有限公司产品;超纯水制造仪,四川优普超纯科技有限公司产品;电磁炉,宁波奥克斯厨房电器有限公司产品;AUY220型电子天平,上海光学仪器一厂产品。

1.2 方法

1.2.1 饱和盐水漂浮法 用洁净玻璃棒挑取3～5 g藏猪粪便至50 mL离心管中,并加入适量饱和盐水搅拌至匀浆状,之后加饱和盐水至50 mL,混匀后经60目网筛过滤至烧杯中,倒入小玻璃瓶中,并确保液面微凸于瓶口且不溢出。静置10 min,用载玻片轻触粪液液面,翻转载玻片并盖上盖玻片,于100×显微镜下进行镜检,仔细观察盖玻片覆盖的所有区域,若发现卵囊/虫卵,于400×显微镜下拍照记录。

1.2.2 卵囊/虫卵计数法 根据文献[6]中报道的改良麦克马斯特计数法统计每克粪便中的虫卵数(eggs per gram,EPG)和卵囊数(oocysts per gram,OPG)。计算公式为:OPG/EPG=[(n1+n2)/(2×0.15)]×60/2,公式可简化为OPG(EPG)=(n1+n2)/2×200。

1.2.3 统计学分析 用SPSS 25.0软件中的卡方(χ2)检验对不同因素下藏猪消化道寄生虫的感染率进行统计学分析。P>0.05为差异不显著;P<0.05为差异显著;P<0.01为差异极显著。

2 结果

2.1 藏猪消化道寄生虫虫卵/卵囊形态学检查结果

形态学鉴定发现,样本中有3种线虫虫卵和1种球虫卵囊,分别为猪蛔虫(Ascarissuum)虫卵、猪毛尾线虫(Trichurissuis)虫卵、食道口线虫(Oesophagostomumspp.)虫卵和猪囊等孢球虫(Cystoisosporasuis)卵囊。

2.2 甘孜州藏猪消化道寄生虫感染情况

176份样品中寄生虫虫卵/卵囊阳性率为75%(132/176),猪囊等孢球虫卵囊阳性率为43.18%(76/176)、猪蛔虫虫卵为42.04%(74/176)、猪毛尾线虫虫卵为25.57%(45/176)、食道口线虫虫卵为5.11%(9/176)。不同地区藏猪粪便中消化道寄生虫虫卵/卵囊的阳性率差异显著(P<0.05)(表2)。

表2 不同地区消化道寄生虫感染情况

2.3 腹泻和非腹泻藏猪粪便样品中寄生虫感染情况

腹泻粪便样本寄生虫感染率为80.88%(55/68),显著高于健康粪便寄生虫感染率71.29%(77/108)(P<0.05)。猪囊等孢球虫卵囊在健康猪粪便样本中感染率52.78%(57/108),极显著高于腹泻猪粪便样本27.64%(19/68)(P<0.01),而猪毛尾线虫虫卵在腹泻粪便样本中感染率35.29%(24/68),显著高于健康猪粪便19.44%(21/108)(P<0.05),但蛔虫虫卵和食道口线虫虫卵在健康猪粪便样本中感染率与腹泻粪便样本中感染率差异不显著(P>0.05)(表3)。

表3 腹泻和非腹泻藏猪粪便中寄生虫感染情况

2.4 不同饲养模式藏猪消化道寄生虫感染情况

放牧藏猪感染率85.06%(74/87),显著高于圈养藏猪65.17%(58/89)(P<0.05)。放牧藏猪粪便样本中猪囊等孢球虫卵囊感染率70.11%(61/87),极显著高于圈养16.85%(15/89)(P<0.01),放牧藏猪粪便中食道口线虫虫卵感染率9.2%(8/87),显著高于圈养藏猪1.12%(1/89)(P<0.05),但猪蛔虫虫卵和猪毛尾线虫虫卵在放牧和圈养藏猪粪便中的差异不显著(P>0.05)(表4)。

表4 不同饲养模式藏猪消化道寄生虫感染情况

3 讨论

甘孜州藏猪养殖主要以放牧为主,圈养藏猪养殖技术落后,其中消化道寄生虫病是藏猪最常见的疫病之一[7]。调查发现,甘孜州部分地区藏猪消化道寄生虫总感染率为75%,高于文献[3]调查的感染率(64.34%),低于文献[8-9]的调查结果(83.3%)。同时,甘孜州各地区之间消化道寄生虫感染差异显著(P<0.05),可能因各地区的气候条件、饲养管理水平和驱虫情况不同有相关。

寄生虫是引起猪腹泻的主要病原之一,寄生虫主要导致肠上皮细胞坏死、脱落、肠黏膜形成异物并引起腹泻[10]。本研究中腹泻粪便样本寄生虫感染率为80.88%(55/68),显著高于非腹泻粪便样本寄生虫感染率71.29%(77/108)(P<0.05),藏猪虽然具有很强的抗病力和抗应激能力[11],但寄生虫感染易引起藏猪腹泻,降低猪的抵抗力。甘孜州地处青藏高原,气温较低,寒冷和恶劣的环境可能是影响病原体传播和感染的一个因素[11-13]。

前期报道发现,不同饲养模式下藏猪消化道道寄生虫感染情况不同,放牧养殖模式消化道寄生虫感染种类、感染率与感染强度多于圈养猪群[3]。本次研究发现,放牧藏猪粪便样本寄生虫感染率85.06%(74/87),显著高于圈养藏猪粪便样本寄生虫感染率65.17%(58/89)(P<0.05),与西藏林芝地区放牧藏猪寄生虫感染率显著高于圈养结果一致。在甘孜州,藏猪、牦牛、藏羊混养放牧且密切接触,致使放牧养殖藏猪寄生虫感染率偏高[14]。