拉莫三嗪对脑出血大鼠脑组织含水量的影响

郭志松 邵换璋

河南省人民医院中心ICU 郑州 450003

1 资料与方法

1.1 实验动物和分组 健康成年雄性 Wistar大鼠72只,体质量220～250 g,由郑州大学实验动物中心提供,合格证号:SYK2006-11。随机分为对照组 8只,手术组 32只,治疗组32只。后2组又分为12 h、1 d、3 d、7 d四个时间点进行脑组织含水量检测,每组每个时间点为8只大鼠。

1.2 脑出血模型的制作和成功的标志 大鼠经10%水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉后,俯卧位固定于立体定位仪上,用微量进样器由股动脉抽取血液 50μl缓慢注入尾状核位置,留针15min。对照组注入等量生理盐水。动物麻醉清醒后,参照Zea Longa等评分标准,累积1分以上为成功模型。

1.3 脑组织含水量的测定 实验大鼠断头取脑后,取进针道前约3 mm厚的脑组织。用电子天平先称取湿重,电热恒温培养干燥两用箱100℃烘烤48 h,再称取干重。利用脑组织含水量=(鲜质量-干质量)/鲜质量×100%进行计算。

1.4 统计学方法 所有数据以均数±标准差表示组间比较用方差分析,数据处理采用SPSS 12.0软件进行分析。α=0.05为检验水准。

2 结果

2.1 实验动物的一般情况 在脑出血模型中,有3只大鼠死亡,其中4只死于麻醉意外,2只死于出血波及颅底,由备用动物补充。脑出血组动物麻醉清醒后均出现不同程度的精神萎靡,反应迟钝,自洁能力下降,进食减少。对照组大鼠精神恢复,反应及进食正常。脑出血大鼠于术后6 h即可观察到其行为学改变,均出现较明显左侧肢体偏瘫、旋转爬行或拖步行走,神经缺损体征以造模后12～24 h最为明显,72 h后分别出现不同程度的改善。对照组未出现上述神经缺损症状。

2.2 脑组织含水量变化 手术组脑组织含水量在出血后12 h开始增加,3 d时水肿达到峰值,7 d有所减轻,治疗组与手术组比较各时间点的脑组织含水量均相应降低,差异具有统计学意义(P＜0.05)。对照组在12 h～7 d变化不明显。详见表1。

表1 各时间点大鼠脑组织含水量的变化 (%)

3 讨论

拉莫三嗪的化学结构为3,5-二氨基-6-(2,3-二氯苯基)-1,2,4-三丫嗪,目前主要用于难治性癫的治疗。其作用环节是抑制突触前膜兴奋性氨基酸谷氨酸的释放,抑制钠通道开放,稳定过度兴奋的神经元膜,减少Cl-和H2O被动进人细胞内达到减轻脑水肿的作用[1]。

国内有报道LTG可通过降低神经细胞外液谷氨酸的浓度,减轻脑外伤后急性脑水肿[2],但对脑出血后脑水肿的治疗作用未见报道。本研究发现脑出血后手术组脑组织含水量在出血后12 h开始增加,3 d时水肿达到峰值,7 d有所减轻,治疗组与手术组比较各时间点的脑组织含水量均相应降低,差异具有统计学意义(P＜0.05)。对照组在12 h～7 d变化不明显。认为其可能机制是:(1)作用于电压依赖钠通道,抑制突触前膜谷氨酸的释放,从而使NR1激活减少,细胞损害减轻。本实验中可见 NR1在治疗组的阳性表达明显减少,细胞损害减轻,与Bather[3],Pisani[4]的研究一致。(2)作用于电压门控性钙通道(VGCCs)参与神经元兴奋性和传导性的调节,并通过钙离子浓度的变化影响第二信使系统。VGCCs还参与细胞毒性作用,通过激活一系列酶活动,产生细胞损害。LTG可作用于VGCCs调节神经递质释放,降低钙调性细胞毒性而发挥神经保护作用。此外对离体脑皮层突触小体的研究中,发现LTG通过减少突触前膜钙离子内流,以浓度依赖的方式,抑制由4-AP诱导的皮质,纹状体谷氨酸盐的释放。还能减少因膜去极化产生的细胞内游离钙离子浓度升高[5]。

该研究提示拉莫三嗪可以减轻实验脑出血大鼠脑组织含水量,早期应用拉莫三嗪进行治疗可能作为预防和减轻脑损伤的有效途径。

[1]Peck AW.Clinical pharmacology of lamotrigine[J].Epilepsia,1991,32:9-l2.

[2]程员.拉莫三嗪治疗脑外伤后脑水肿的实验研究[J].中华创伤志,1998,14:209-211.

[3]Pisani F,Pedale S,Macaione V.Neuroprotective effect of lamotrigine and remacemide on excitotoxicity induced by giutamate againist in isolated chick retina[J].Exp Neurol,2001,170:162-170.

[4]Wang SJ,Tsai JJ,Gean PW.Lamotrigine inhibits tetruethylammonium induced synaptic plasticity in the rat amygdala[J].Neuroscience,1997,81:667-671.

[5]Wang SJ,Sihra TS,Gean PW.Lamotrigine inhibition of glutamate release from isolated cerebrocotical nerve teminals by amppression of voltage-activated calcium channel activity[J].Neuroreport,2001,12:2255-2258.