降脂通便颗粒治疗小鼠便秘的疗效及对血中肽类神经递质、一氧化氮水平的影响

蒋 筱 (广西中医学院，广西 南宁 530001)

中医认为便秘是脾胃气机失调的一种表现，与胃肠动力学的关系非常密切。降脂通便颗粒主要由丹参、田七、川芎、泽泻、人参、当归、首乌、黄精等组成，具有益气通脉、活血化瘀、润肠通便之功效，临床主要用于治疗老年性便秘、习惯性便秘等气血两虚型患者，治疗效果显著。本实验观察降脂通便颗粒对小鼠便秘的治疗效果以及对小鼠血清肽类神经递质(SP)、一氧化氮(NO)水平的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 药物及试剂 降脂通便颗粒(规格:5 g/袋，本院自行研制，使用前将颗粒磨细，以通过80目筛为标准，用0.9%氯化钠溶液配成0.2、0.4 g/ml的混悬液)。SP、NO的 ELISA检测试剂盒购自上海沪峰生物科技有限公司。

1.1.2 动物 清洁级(Ⅱ级)昆明种雄性小鼠48只，体重18～22 g，广西医科大学医学实验动物中心(桂动许字〈2000〉第001号)提供。实验动物房合格证号:桂医动字第23003号。

1.2 方法

1.2.1 分组 48只小鼠随机分为4组:①健康对照组，②模型组，③降脂通便颗粒低剂量组(0.2 g/ml，0.2 ml/10 g)，④降脂通便颗粒高剂量组(0.4 g/ml，0.2 ml/10 g)，每组12只，单笼喂养，健康对照组饮水、饲料不限，其余各组控制饲料量平均为80 g·kg-1·d-1，饮水不限。除健康对照组外，均建立小鼠便秘模型:用5 000 g沸水浸泡番泻叶500 g，10 min，75℃水浴中将滤液蒸发浓缩成含生药1 g/ml的水煎液。按0.8 ml/d灌胃，小鼠正常饮食水，可造成脾虚模型;从第8天开始，停止灌胃番泻叶水，采用隔天喂生大米4～8 g，自由饮水1次，可最终造成小鼠便秘模型，造模时间共需15 d〔1〕。造模后，模型组小鼠灌胃生理盐水0.2 ml/10 g，治疗组分别给予降脂通便颗粒0.2 g/ml(0.2 ml/10 g)和 0.4 g/ml(0.2 ml/10 g)，连续给药7 d，所有动物自由饮水，饮食同前。

1.2.2 观察指标 记录各组小鼠4 h内大便次数、4 h湿粪数，称量平均便重，并记录第1次排便时间。

1.2.3 血液SP、NO水平检测 收集血样置于含EDTA的LV管中，防止血液凝固。然后将血样转移到含抑蛋白酶肽(0.6 TIU/ml血样)的离心管中，轻轻混匀，抑制样品中蛋白酶的活性。4℃，1 600 r/min，离心15 min，收集血浆。于-70℃保存。采用ELISA方法检测SP和 NO水平〔2〕。

1.3 统计学方法 采用SPSS10.0统计软件，计量资料以s表示，组间比较采用t检验。

2 结果

2.1 各组小鼠大便次数、平均便重、排便时间比较 与健康对照组比较，模型组大便次数减少、平均便重减少、排便时间延长、粪便硬并且量少(P＜0.05)。与模型组比较，各治疗组大便次数明显增多，排便时间减少，平均便重增加，大便变软(P＜0.05)，且存在剂量依赖性。见表1。

表1 各组小鼠大便次数、平均便重、排便时间比较( s，n=12)

表1 各组小鼠大便次数、平均便重、排便时间比较( s，n=12)

与健康对照组比较:1)P＜0.05;与模型组比较:2)P＜0.05;与低剂量组比较:3)P＜0.05;下表同

组别 排便次数 第1次排便时间(min)平均便重(g)健康对照组5.2±0.9 62.3±7.5 0.092±0.003模型组 3.8±1.21) 143.3±23.61) 0.052±0.0021)低剂量组 7.1±1.11)2) 96.4±16.51)2) 1.034±0.0051)2)高剂量组 5.5±1.22)3) 73.5±12.42)3) 0.098±0.0032)3)

2.2 各组小鼠血清SP、NO水平比较 与健康对照组比较，模型组SP水平明显降低，NO水平明显增高(P＜0.05)。与模型组比较，各治疗组SP水平明显增加，NO水平明显降低(P＜0.05)，且有剂量依赖性。见表2。

表2 各组小鼠血清SP、NO水平比较( s，n=12)

表2 各组小鼠血清SP、NO水平比较( s，n=12)

组别 SP(pg/ml)NO(ummol/L)健康对照组57.2±12.2 23.6±12.7模型组 18.9±6.21) 64.7±7.91)低剂量组 43.3±10.11)2) 49.2±13.51)2)高剂量组 60.5±15.72)3) 21.4±11.42)3)

3 讨论

功能性便秘是指排除药物原因及器质性疾病后，由其他原因引起的慢性便秘，现实生活中发生率比较高，主要原因是进食量、纤维素、饮水量的摄入少〔3〕;主要表现为直肠感觉功能衰退，肛门直肠反射减退，排便时盆底肌肉紊乱。祖国医学认为本病之因“思虑，气怫郁，气壅大肠，大便乃结”。劳倦内伤、气血阴津亏虚、肝肾不足、络脉血行不畅，则大肠传导无力而造成。肺气虚津液输布异常，气机宣降失职，肠道津液亏少，脾气虚，气血津液无以化生，津血枯燥，而成无水行舟之候，肾气虚开合失司，肠道津枯失于传导。肺脾肾气虚，津血亏乏是本病发病的主要原因〔4，5〕。

降脂通便颗粒主要由田七、丹参、川芎、人参、泽泻、首乌、当归、黄精等组成，具有益气通脉，活血化瘀之功效。方中丹参去滞生新、善治血分，调经顺脉，具有改善全身血液循环、降低血小板凝聚等作用。首乌固精益肾、养血益肝;黄精壮骨添精、补中益气;田七散瘀定痛，止血消肿;配合人参益气，当归养血〔6〕;诸药配合，具有益气通脉、活血化瘀、润肠通便之功效。临床主要用于老年性便秘、习惯性便秘等气血两虚型患者，治疗效果显著。

已有研究表明，NO是一类肠道抑制性神经递质，当患者由于某些原因出现肠壁内NO异常增多时，可导致结肠、直肠动力减弱，兴奋性下降最终引起便秘。而SP对胃肠道的平滑肌具有兴奋功能，慢性功能性便秘患者直肠组织活检SP含量明显下降，导致肠道处于麻痹状态而出现便秘〔7，8〕。本研究也证实了这一点，同时发现降脂通便颗粒可能调节SP和NO在体内的变化，促进结肠和直肠恢复正常的生理功能。

综上所述，降脂通便颗粒可以明显增加排便次数及排便的重量，缩短便秘小鼠排便时间，改变小鼠大便的性状，可能通过调节血清中SP、NO水平而发挥治疗作用。

1 费改顺，贾正平，孟庆常，等.润肠便颗粒对小鼠便秘及肠推进作用的实验研究〔J〕.解放军军医学学报，2010;26(1):37-41.

2 郭淑云，徐江雁，高丽英.润肠通便浓缩丸治疗慢性功能性便秘30例临床观察及对患者血中SP、NO影响的研究〔J〕.中医研究，2006;19(1):26-7.

3 张美玲，李 红，张兆芳，等.大叶车前子胶胶囊对小鼠便秘影响的实验研究〔J〕.甘肃中医学院学报，2006;23(3):14.

4 林子洪，吴敬勋，肖梓栋，等.芦荟对小鼠便秘的作用及其机制初探〔J〕.广东医学，2005;26(10):1336-8.

5 刘 彬，徐贵发，韩文婷，等.罗汉参对小鼠通便作用的研究〔J〕.山东大学学报(医学版)，2009;47(2):95-8.

6 李明芳.益气通便胶囊治疗小鼠便秘的实验研究〔J〕.山西医科大学学报，2007;38(2):1103-5.

7 唐学贵，伍 静，刘 芳.便塞通合剂调节慢性便秘大鼠血清GAS、MTL和SP含量实验研究〔J〕.中华中医药学刊，2011;29(7):1549-51.

8 赵子剑.硝菔通结口服液对便秘大鼠肠神经递质SP、VIP含量的影响〔J〕.山西中医，2007;23(1):70-1.