微柱凝胶法测ABO血型正反定型不符原因及处理

宋立娟 宋立晶 秦 军

(宁夏回族自治区银川市第一人民医院检验科 宁夏银川 750001)

在使用微柱凝胶法(MGT)进行日常ABO血型鉴定过程中，往往会碰到一些受抗原减弱、ABO亚型、冷凝集素、个体疾病等因素影响，导致血型正反鉴定不符和交叉配血困难，一旦血型定型失误，将会发生严重的溶血性输血反应，导致急性肾衰竭而危及患者生命，抢救不及时者可引起患者死亡。因此，在临床上做好疑难血型鉴定至关重要。本科使用微柱凝胶法对2000余份血型标本进行检测，除技术和试剂管理因素的干扰以外，发现了24例正反定型不合的现象，经整理后原因分析报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本院2012年1月～12月对住院患者2000份标本进行ABO血型正、反定型检测，其中发现的24例正反定型不符合的标本。

1.2 试剂(上海血液生物医药有限公司);ABO标准红细胞(本科室制备);血型血清学卡式离心机(长春博研公司);血型血清学试管离心机(公司);孵育箱和离心机(达亚美公司)恒温水浴箱(天津泰斯特公司)。

1.3 方法 正反定型、配血试验、抗体鉴定等检测参照《全国临床检验操作规程》［1］和《临床输血诊疗技术》［2］。所有血型检测标本均按如下步骤进行血型鉴定:第一次均采用微柱凝胶法进行正反定型鉴定，如果没有问题，发出血型报告;如果出现正反定型不符、对照孔阳性、凝集减弱等疑难情况，使用10%红细胞悬液或增加受检者血清/血浆量进行盐水凝集试管法检测，并结合显微镜观察凝集结果;如果还不能得出正确结论，将标本和试剂混合后分别放入37℃水浴箱或4℃冰箱孵育30min，再离心观察结果。同时，为排除自身抗体的影响，可用生理盐水对标本洗涤3次后再进行检测。所有疑难血型鉴定出来后，与同型献血员标本进行交叉配血试验，以主次侧无凝集无溶血为准，可以发出血型报告。

2 结果

应用MGT法检测患者ABO血型时，发现正反定型不一致的标本共24例，患者血浆中含有纤维蛋白5例(20.83%);高效价冷凝集素2例(8.33%);血清蛋白异常增高3例(12.50%);红细胞抗原减弱6例(25.00%);抗体缺失或减弱8例(33.34%)，见表1。

表1 MGT法检测ABO血型正定型不一致的因素

3 讨论

微柱凝胶免疫检测(MGIA)即红细胞抗原抗体在微柱腔凝胶介质中发生肉眼可见的凝集反应。它是利用分子筛技术、离心技术和特异性的免疫反应技术原理，把血型血清学技术与凝胶分子筛技术有机地结合起来，具有操作简单、客观，准确度、灵敏度高的特点。虽然微柱凝胶检测技术具有诸多优点，但是由于其本质是采用单克隆或多克隆抗体与红细胞凝集进行测定，抗原、抗体的强弱变化、新生儿抗体未形成、红细胞膜结构改变、血液中不正常血清蛋白、异基因造血干细胞移植以及高效价冷凝集素(自身冷抗体)等，都可干扰MGT法测血型的结果，引起正反定型不一致，影响血型的正确判定。如果再加上微柱凝胶卡保存不当，致使管内液体减少，在患者红细胞抗原或血清抗体明显减弱情况下，抗原抗体来不及搭桥，造成假阴性［2］。由于盐水凝集试管法可自由调节红细胞浓度、血清/血浆使用量，正好弥补了微柱凝胶法这一技术的缺陷。微柱凝胶法初次检测出现正反定型不一致的情况，加大受检者红细胞浓度或受检者血清/血浆量，调整抗原抗体反应比例至最适反应比例后，结合盐水凝集试管法，最终正确鉴定血型，表明血型抗原或抗体只是减弱或降低，并不是完全缺失。除了抗原和抗体减弱严重影响微柱凝胶法对血型的正确鉴定外，还有一个重要的因素是高冷凝集素的影响，高效价冷凝集素是患者体内产生了抗自身红细胞的嗜异性冷抗体。此抗体为IgM类，在体外4℃或室温条件下可与自身红细胞或ABO系统其他各个血型的红细胞发生非特异性凝集反应，不规则抗体可呈强阳性，在正反定型和交叉配血中可出现全凝集现象而易误判血型。对此可采用37℃水浴箱加生理盐水洗涤后，微柱凝胶法结合盐水凝集试管法，做出正确判断。总之，微柱凝胶法作为一种主流血型检测方法，有其自身的优点和不可替代性，盐水凝集试管法作为一种传统血型检测方法，可作为微柱凝胶法的有益补充，两者取长补短，相互结合，有助于临床上更加准确地鉴定疑难血型。

［1］杨世明，张勇萍，崔 颖.微柱凝胶法检测疾病对ABO血型抗原的影响及血清学特性分析［J］.细胞与分子免疫学杂志，2005，21(6):755

［2］林海芬，谢作听，王春香.改良微柱凝胶法在鉴定ABO血型抗原明显减弱者中应用［J］.临床输血与检验，2004，6(4):267